4.制备和应用固定酶化酶.doc

4、制备和应用固定化酶 【学习目标】 1.简述固定化酶的作用和原理。 2.说出酶固定化的方法　 3.尝试用包埋法制备固定化酵母细胞 4.探讨固定化酶的应用价值。 【考纲要求】酵母细胞的固定化技术：B级 【基础回顾】 一、基础知识 1、固定化酶：利用物理或化学的方法将酶与 结合在一起形成的仍具有 的酶复合物。常用方法：包括 、 和 法。 2、固定化细胞是通过各种方法将细胞与一定载体结合，是细胞仍具有原有的生物活性的技术。 3、包埋法固定化细胞是指将微生物细胞均匀地包埋在 的 性载体中。常用的载体有 等。 二、实验操作 1、制备固定化酵母细胞：包括步骤为① ，② ， ③ ，④ ，⑤ 。 2、用固定化酵母细胞发酵：①将固定好的酵母细胞（凝胶珠）用 冲洗2-3次，②将10%的葡萄糖溶液加入锥形瓶中，再加入固定好的酵母细胞，置于 ℃下发酵24h。 【共同探究】 一、基础知识 1、固定化酶的概念： 优缺点 。 【思考题1】下列属于固定化酶在利用时特点的是 A．有利于酶与产物分离 B．制成的加酶洗衣服可以被反复利用 C．能自由出入依附的载体 D．能催化一系列的酶促反应最重要的一环下列有关制备固定化酵母细胞叙述错误的是A．在向溶化好的海藻酸钠溶液中加入的必须是已活化的酵母细胞 B．溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温，才能加入细胞 C．溶解海藻酸钠，最好采用小火，或者持续加热的方法 D．在固定化酵母过程中，要以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaC2溶液中右图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图．下列叙述正确的是 A．溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液- B．图1中X溶液为溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠 C．图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触 D．图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中 凝胶珠的颜色和形状 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。 【思考题6】发酵的葡萄糖溶液 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产生了很多气泡，同时会闻到酒味。 【思考题7】是否可以利用固定化细胞发酵果酒和果醋？ 【思考题8】固定化酶和固定化细胞是否可以长期使用？为什么？ 【思考题9】直接使用酶、使用固定化酶和使用固定化细胞催化反应，各有哪些优点和不足？请填写下列表格中的相关内容 类型 优点 不足 直接使用酶 固定化酶 固定化细胞 【思考题10】请根据上述过程回答下列问题 （1）酵母菌活化就是 状态。活化前应选择足够大的容器，因为酵母细胞活化时 。 （2）影响此实验成败的关键步骤是 。此步的操作应采用 。 （3）CaCl2溶液在形成凝胶珠时的作用原理是 。观察形成的凝胶珠颜色和形状：如果颜色过浅，说明 ；如果形成的凝胶珠不是 形，说明实验操作失败。 （4）在工业生产中，细胞的固定化是在严格 的条件下进行的。 【课堂巩固】 1．下列关于固定化酶的说法正确的是 A．酶被固定在不溶于水的载体上，可反复利用 B．酶作为催化剂，反应前后结构不改变，所以固定化酶可永远利用下去 C．酶由于被固定在载体上，所以丧失了其高效性和专一性 D．被固定化的酶