[MolecularClone中文说明.docxVIP

分子克隆javascript:void(0)编辑在/subview/25255htm \t _blank分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的/view/8563.htm \t _blank基因，用/view/3853624.htm \t _blank体外重组方法将它们插入/view/667333.htm \t _blank克隆载体，形成/view/440124.htm \t _blank重组克隆载体，通过转化与/subview/225836/225836.htm \t _blank转导的方式，引入适合的寄主体内得到复制与扩增，然后再从筛选的/subview14290341.htm \t _blank寄主细胞内/view/3030258.htm \t _blank分离提纯所需的/view/1364.htm \t _blank克隆载体，可以得到插入DNA的许多拷贝，从而获得目的基因的扩增。中文名分子克隆外文名clone分?类生物科技主?题DNA方?法DNA分离引入寄主细胞转化或转染、转导目录1/view/534568.htm \l 1摘要2/view/534568.htm \l 2方法??/view/534568.htm \l 2_1DNA片段的制备??/view/534568.htm \l 2_2载体DNA的选择??/view/534568.htm \l 2_3DNA片段与载体连接??/view/534568.htm \l 2_4引入寄主细胞??/view/534568.htm \l 2_5克隆的选择3/view/534568.htm \l 3重要意义与应用??/view/534568.htm \l 3_1在医学方面??/view/534568.htm \l 3_2在基因治疗方面??/view/534568.htm \l 3_3在工业生产方面??/view/534568.htm \l 3_4在农业生产方面1摘要编辑分子克隆克隆(/subview/556288/556288.htm \t _blankclone,clon)一词源于希腊文Klon，原意为树木的枝条。在生物学中其名词含义系指一个细胞或个体以/view/256692.htm \t _blank无性繁殖的方式产生一群细胞或一群个体，在不发生突变的情况下，具有完全相同的遗传性状，常称无性繁殖(细胞)系；其动词(clone,cloned,cloning)含义指在生物体外用重组技术将特定/view/8563.htm \t _blank基因插入/view/184171.htm \t _blank载体分子中，即分子克隆技术。研究基因的第一步是分离它并获得许多与它完全相同的拷贝。这称为“克隆”基因。一个基因被克隆的过程称为 分子克隆。分子克隆是指分离一个已知/view/1009438.htm \t _blankDNA序列，并以/view/1516642.htm \t _blankin vivo（活体内）方式获得许多复制品的过程。这一复制过程经常被用于增加并获取DNA片段中的基因，但也可用来增加某些任意的DNA序列，如/view/190879.htm \t _blank启动子、/view/3852152.htm \t _blank非编码序列、化学合成的/view/62497.htm \t _blank寡核苷酸或是随机的DNA片断。分子克隆将DNA片段(或/view/8563.htm \t _blank基因)与/view/184171.htm \t _blank载体/subview/1468288/1468288.htm \t _blankDNA分子共价连接，然后引入/subview14290341.htm \t _blank寄主细胞，再筛选获得重组的克隆，按克隆的目的可分为DNA和cDNA克隆两类。cDNA克隆是以mRNA为原材料，经体外/subview/540413/540413.htm \t _blank反转录合成互补的DNA(/subview/212931/212931.htm \t _blankcDNA)，再与载体DNA分子连接引入寄主细胞。每一cDNA反映一种mRNA的结构，cDNA克隆的分布也反映了mRNA的分布。特点是：①有些生物，如/subview/501339/501339.htm \t _blankRNA病毒没有DNA，只能用cDNA克隆；②cDNA克隆易筛选，因为cDNA库中不包含非/view/433550.htm \t _blank结构基因的克隆，而且每一cDNA克隆只含一个mRNA的信息；③cDNA能在细菌中表达。cDNA仅代表某一/view/4474336.htm \t _b