遗传实验实验三 果蝇的双因子实验.doc

专业班级：生物2班 学号：20120322234 姓名：刘显号 同组人：关德红、林星龙、莽斌、李玉圣、杨伏东、郄凯鑫、桤正富 实验日期：2014年04月09日——2014年05月07日 平均室温：27.3 平均大气压:82.52Kpa 实验三、果蝇的双因子实验 一、目的 1.1、通过双因子杂交验证遗传学基本规律————自由组合规律。 1.2、验证两对非等位基因间的自由组合现象和遗传规律。 1.3、掌握实验果蝇的杂交技术并学习记录交配结果和掌握统计处理方法。 二、原理 位于非同源染色体上的两对基因，它们所决定的两对相对性状在杂种第二代是自由组合的。根据孟德尔定律一对基因的分离与另一对基因的分离是相互独立的，因此两对不相互连锁的基因所决定的性状在杂种二代就呈现9:3:3:1之比。 本实验以与♀）×灰体残翅（♂） ↓ F1：灰体长翅（+e/+vg） ↓ F2：灰体长翅：黑檀体长翅：灰体残翅：黑檀体残翅 9：3：3：1 反交P：黑檀体长翅（♂）×灰体残翅（♀） ↓ F1：灰体长翅（+e/+vg） ↓♀.♂相互交配 F2：灰体长翅：黑檀体长翅：灰体残翅：黑檀体残翅 9：3：3：1 三、材料与方法 3.1材料：黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）3.4.1培养基的配制 A：糖6.2克，加琼脂0.62克，再加水40ml煮沸溶解； B：玉米粉8.25克，加水40ml，加热搅拌均匀，再加0.7克酵母粉；A和B混合加热成糊状后，加0.5ml丙酸，即可分装到培养瓶中。 倒入培养基的厚度约2厘米，在培养基中插入一张消过毒的干燥硬纸片，以扩大果蝇的活动场所。 将培养瓶置入高温高压灭菌锅内，以121℃灭菌30分钟。 灭菌完成后，待灭菌锅内压力降至常压后开启锅盖使其半开，再以灭菌锅干燥培养瓶之棉塞30分钟，完成后取出使其冷却备用。 待培养基冷却后，用酒精棉花擦去瓶壁上的水珠。 3.4.2收集处女蝇 3.4.3杂交：准备好培养基，把已麻醉的的残翅果蝇和黑檀体果蝇果蝇，按正反交方式放入不同的培养基内，进行杂交，贴好标签。 3.4.4去亲本：6——7天后，见到有F1幼虫出现，可除去亲本。 3.4.5观察F1：再过3——4天，检查F1成蝇的性状，应该是灰体长翅，若性状不符，表明实验有差错，不能再进行下去。 3.4.6F1杂交：按原来的正反交各选10对F1成蝇，换新的培养基，继续饲养。 3.4.去F1亲本：7天后，除去F1代亲本 3.4.8观察并记录：再过4天，F2代成蝇出现，麻醉以后，倒在白瓷板上，进行统计，每隔两天统计一次，连续统计十几天。 四、结果与分析 结果： 在F1代正交，F2代真实比例为：灰体长翅：黑檀体长翅：灰体残翅：黑檀体残翅=216：75：80：24。 在F1代反交，F2代真实比例为：灰体长翅：黑檀体长翅：灰体残翅：黑檀体残翅=231：78：83：23。 分析： 由F2的正交进行测验结果x2=0.667,可知0.8＜P＜0.9，灰体长翅：灰体残翅：黑檀体长翅：黑檀体残翅≈9:3:3:1。 由F2反交结果进行测验结果x2=0.72，可知0.8＜P＜0.9，灰体长翅：灰体残翅：黑檀体长翅：黑檀体残翅≈9:3:3:1。 可得出控制两对相对性状的两对等位基因在胚子的形成过程中，都按照分离定律发生分离，两对等位基因间发生自由组合，基因的分离和自由组合是独立的，互不干扰的。 五．讨论与结论 1、为什么该实验中F1不要处女蝇而亲本要处女蝇？ （1）F1中不要处女蝇的原因：此次实验做的一般是黑腹果蝇的突变品种杂交实验，黑檀体突变型和残翅突变型为亲本——这时雌雄果蝇必须是处女蝇，因为F1幼虫出现时要把亲本果蝇倒干净，F1本身就需要自交产生性状分离比为9:3:3:1的F2代。那么就不要求F1是处女蝇了。 （2）亲本果蝇要求是处女蝇的原因：因为只有双亲是处女蝇才能保证实验得到的遗传性状比符合遗传定律，雌果蝇的生殖器里可以保存大量的精子，如果不是处女蝇，则可能使果蝇后代不是所有的雄蝇交配的来的。实验统计结果可能不是预期的，和预期的必然出现差异。 2、为什么该实验的F2代，灰体长翅：灰体残翅：黑檀体长翅：黑檀体残翅不等于9:3:3:1而是近似？ 由反交结果进行测验得x2=0.667，0.8＜P＜0.9，灰体长翅：黑檀体长翅：灰体残翅：黑檀体残翅数的比值也接近9：3：3：1，由此可以确定果蝇的长翅与残翅和灰体与黑檀体这两相对性状是位于常染色体上的两对等位基因，这两对基因在杂合状态中保持相对的独立性，而在配子形成时，又按原样分离到不同的配子中去，导致子二代的表性比为9：3：3：1。同时也可以确定长翅是受显性基因控制的，而残翅则是受隐性基因控制的，灰体是受显性基因控制的，而黑檀体则是受隐性基因控