硕士开题报告书.doc

安徽医科大学 攻读 硕博 士学位论文课题开题报告书 研 究 生 刘于海 学 号 2008622 年 级 2008级 学 院 省立医院 专 业 神经外科 导 师 牛朝诗 开题报告日期: 2009 年 11 月 30 日 安徽医科大学研究生学院制表 说 明 本报告书在导师审查并签名后由研究生本人在本教研室内作过开题报告前一周报送开题小组专家人手一份，以便专家查阅并做好提问、建议等准备；开题后由各教研室保留，并作答辩时的重要参考资料，最后归入研究生后期培养档案。 研究课题名称 Nanog基因与胶质瘤干细胞生物学特性的相关性研究 研究课题的目的、理论与实际意义、国内外研究情况简介 1.研究课题的目的： 探讨Nanog基因与胶质瘤干细胞及其生物学特性的关系；为明确胶质瘤生物学行为和治疗胶质瘤提供新途径。 2.课题的理论与实际意义，国内外研究的情况简介： 胶质瘤是人类最常见的脑肿瘤。传统的治疗方法包括手术、放疗和化疗，治疗效果有限，尤其是高级别胶质瘤，发病率和死亡率仍然较高[1]，迫使人们去寻找新的治疗方法。肿瘤干细胞的提出，为肿瘤治疗提供了新途径。脑胶质瘤干细胞的存在已经得到证实，它和胶质瘤的发生、恶性生长和复发有密切关系，成为研究治疗脑胶质瘤的新工具。 肿瘤细胞和干细胞在很多方面具有相似性：都能不断增殖和更新；可以分化为具有多种表型和生物学特性的子代细胞； 共有一些如PTEN、Notch、Wnt、Hedgehog 及BMI1 等信号通路；干细胞归巢现象与肿瘤的侵袭和转移现象的相似等[2]。据此，人们提出了肿瘤干细胞（cancer stem cells, CSCs）学说，认为：肿瘤组织中存在极少量干细胞样细胞，它们可以不断增殖，自我更新，并具有多向分化潜能，在启动肿瘤形成和生长中起到决定性作用，而其余大多数细胞经过短暂分化，最终死亡[3-5]。 肿瘤干细胞具有正常干细胞共有特性：自我更新、自我分化、多向分化潜能和终生增殖分化能力。Inagaki等[6]从新鲜脑胶质瘤标本中分离得到CSCs，这些细胞可以自我更新和增殖，分化为神经元样和胶质细胞样细胞，这种特性可以维持两年以上。Pellegatta 等[7]将GL261 胶质瘤细胞（GL261-AC） 和从GL261 细胞株里分离出的胶质瘤干细胞（GL261-NS） 分别注入C57BL/N 同源鼠纹状体内，第7天发现肿瘤细胞致瘤小且仅局限于注射部位周围，而肿瘤干细胞致瘤广泛，浸润脑实质，向室管膜下腔迁移，浸润至室管膜，达脑室；第15天鼠脑MRI显示，GL261-NS致损伤面积明显大于GL261-AC，组织学结果证实了影像学表现；荷瘤鼠生存分析表明注射GL261-NS 的小鼠生存中位数明显小于注射GL261-AC 的小鼠（P0.0001）。Singh[8]、Kondo[9]和尹昌林[10]等，从人胶质瘤组织或小鼠胶质瘤细胞系中分离得到胶质瘤干细胞，并在小鼠不同组织内证实了其成瘤性，表型和原肿瘤相同。肿瘤干细胞可能就是肿瘤的始发细胞之一。 CD133是表达在人干细胞的一种表面糖蛋白抗原。CD133抗原可表达于人类多种正常干细胞，也在一些恶性肿瘤干细胞中表达，如：乳腺癌、视网膜母细胞瘤、畸胎瘤、白血病细胞以及脑肿瘤等。因此常被用来作为干细胞的鉴定标志和分离工具。Nestin 是较晚被发现的中间丝， 分子量为210000--240000，表达于神经干细胞和前体细胞，随着分化的加深，表达逐渐减弱，成熟的神经元内不表达。因此nestin 被广泛用于神经干细胞和脑肿瘤干细胞的鉴定。 2003年Mitsui和Chambers等将胚胎干细胞（embryonic stem cells，ESCs）内新发现的重要基因Ecat4 (ES cell associated transcripts．4)命名为Nanog。Nanog是维持干细胞自我增殖和亚全能性的关键性基因，是全能性或多能性干细胞标记物。必威体育精装版研究发现，Nanog不仅是维持胚胎干细胞自我更新和多向分化潜能的重要转录因子，而且似乎与肿瘤有着千丝万缕的联系。有实验表明，转入Nanog 的NIH3T3 细胞表现出生长速度加快和转化表型[11]。另有研究表明，当Nanog 转入造血干细胞后，不但没有增强细胞的自我更新能力，相反，还导致产生了γδT 细胞