Analyst软件应用培训教程解析.doc

Analyst 软件应用培训教程 关于本教程的说明： 本教程为AB Sciex公司为在中国使用的客户培训的辅助材料。 本教程仅提供给经过AB Sciex公司培训合格的操作人员使用。 本教程内容仅限于Analyst 软件基本操作和应用部分。 本教程提供的分析方法仅对用户起参考作用。 本教程解释权在AB Sciex公司。 目录 1、定量分析简明流程 2、成功定量分析应注意的问题 3、定性分析原则与方法 4、LC-MS 实验经验与仪器维护常识 5、Analyst 软件操作简介： Calculator 功能与使用 Library 功能与使用 部分Script 功能与使用 其他 6、Analyst 软件QTRAP 功能基本操作简介： QTRAP 扫描速度的校正 QTRAP 系统的扫描方式 QTRAP 系统IDA 指南 7、部分化合物液质分析参考方法和信息 8、压力单位转换表 LC-MS/MS 定量分析简明教程 首先确认仪器已经校准，气体、电压工作正常 一．溶液配制 分别将待分析化合物的标准物质配制成1～10 ppm (1～10ug/ml) 的溶液，用于注射泵连续进样，以优化质谱参数。 二．Q1 Scan ，确定母离子 a．选择或建立Project 建立一个新项目 (Project)： 点击Tools→Project→Creat Project，出现下图对话框，键入项目名称，点击“Add All”添加项目功能，点击OK，完成。 b. 硬件配制：激活MS 主机，如果是API2000、3200，硬件配置文件中的质谱主机中应选择Integrated Syringe Pump 。 c. 进入MS 的Manual Tuning 界面，并设置注射泵流速5～10ul/min 。 d．选择质谱扫描方式：Q1 Scan，设置扫描范围(应包含待分析的化合物)；根据化合物性质，选择扫描极性 e．手动调节DP、GS1 等参数，使喷雾平稳、待分析化合物信号灵敏度较高 f．MCA on ，点击Acquire，采集并存储20～50 张加和图谱(根据灵敏度)，并保存方法，例如：Q1.dam g．在质谱图区域，点击右键－“Open File”打开图谱，局部放大，确定母离子的质荷比，准确到0.1amu 。，如下图，母离子m/z 应为609.3。 三．Product Ion Scan ，确定子离子 以第一步测得值为母离子，做Product Ion Scan（MS2），手动调节CE 等参数，使母、子离子都具有一定强度，一般以母离子的强度占图谱中基峰强度的1/3 到1/4 为宜。 MCA on ，点击Acquire，采集并存储20～50 张加和图谱，并保存方法，例如：609-MS2.dam。 在质谱图区域，点击右键“Open File”打开图谱，选择2 个最高的子离子，如上图中，选择195、397，局部放大，确定子离子的质荷比，准确到0.1amu， 则上面两个子离子为195.2、397.3。 四．MRM，优化质谱中与化合物相关的参数 以前两步选定的母离子、子离子，组成离子对，例如609.3/195.2，609.3/397.3 等，做MRM Scan，每个离子对的分析时间100 或200ms。 通过Edit Ramp ，分别优化Compound 项下的各参数，如DP、EP、CE、CXP 等：点击Edit Ramp ，选择要优化的参数→点击OK，出现该参数的优化窗口，可以根据需要改变该参数的优化范围(Start、Stop)和优化步长(Step)。不同参数需逐一优化。 然后保存方法，例如609-MRM.dam。 同样步骤，优化需要分析的另外化合物，分别保存方法。 五、将MRM 方法转化为液质联用方法 关掉所有质谱分析界面，将现有质谱体系灭活，激活液相色谱、质谱设备。 单击Acquire 中Build Acquire Method ，打开上面保存过的MRM 方法，右键 显示方法左边导引条中第一行Acquire Method，点击Add/Remove Device Method 添加设备：色谱泵、自动进样器 选中方法左边导引条中第一行Acquire Method 参数页，设置色谱同步。 设置色谱参数，分析时间一般为0.8～1min ，流动相组成和流量与实际样品分析时相同；修改质谱分析时间 (Duration ，一般设置0.8～1min) ，与色谱参数一致；设置GS1、GS2、TEM 初始值为40、40、400 左右，保存方法，例如：LC-MRM.dam。 六、源参数优化 将上面用过的样品溶液稀释100～1000 倍。 在Tune 项下，双击 Quantitative Optimi