发酵学复习资料(相对比较全面,包含作业)..doc

发酵学 作业 在发酵过程中染菌的处理方法。 答：1、判断：（1）、噬菌体污染时：?、噬菌体污染后往往出现发酵液突然转稀；?、在较短时间内菌体大量自溶，最后仅残留菌丝断片；?、平皿培养出现典型的噬菌斑；④、溶氧浓度回升提前；⑤、营养成分很消耗，产物合成停止等现象，如糖耗减慢，尾气中二氧化碳的量减少。 （2）、一般菌体污染：?、连续3个时间的酚红肉汤无菌样发生颜色变化成浑浊；双碟上连续3个时间样品长出杂菌。?、溶氧水平异常变化，显示染菌。（如下图所示）?、糖耗加快，尾气中二氧化碳的量增加。 （注：上为：污染非好气性杂菌；中为：正常发酵?、发酵液用高压蒸汽灭菌后放掉，严防发酵液任意流失；?、全部停产，对环境进行全面的清洗和消毒，断绝噬菌体的寄生基础；?、更换生产菌种，不断筛选抗噬菌体菌种，防止噬菌体的重复污染。（2）、杂菌：?、种子罐：直接灭菌后废弃；?、发酵罐：a、前期染菌：若危害性大，采用蒸气灭菌经过滤处理后放掉，若危害性不大，可用重新灭菌、重新接种的方式处理；b、中后期染菌：加入适量的灭菌剂（抗生素），降低培养温度或控制补料量来控制杂菌的生长速度；?、设备：用甲醛等化学物质处理，再用蒸气灭菌（包括各种附属设备），在再次投料之前，要彻底清洗罐体、附件，同时进行严密程度检查，以防渗漏。 原因分析：（1）、噬菌体：噬菌体是一种病毒，直径约0.1um，可以通过细菌过滤器，故而通用的空气过滤器不易将其除去；利用细菌或放线菌进行的发酵容易染噬菌体。 、然均规模分析:?、大规模染菌：空气净化系统、空气管道渗漏，或者种子染菌；?、部分罐批染菌：a、某一批号种子染菌；b、某一套连消系统染菌；c、补料管路渗漏或补料液带菌；?、个别罐批连批染菌：设备问题；④、个别罐不连批染菌：培养基灭菌不彻底或操作失误。 、染菌时间分析：?、早期染菌：a、培养基灭菌不彻底；b、种子带菌；c、接种管道灭菌不彻底或者接种操作不当；?、中后期染菌：a、培养基灭菌不充分；b、加入的消沫剂、补料系统灭菌不彻底或渗漏；c、发酵设备渗漏；d、泡沫顶罐。 染菌菌型分析：?、耐热的芽孢杆菌：a、培养基灭菌不彻底；b、设备内部有死角；?、霉菌：种子室、摇瓶间、搅拌轴封、被倒流的空气介质、空气灭菌不彻底。?、不耐热的球菌或杆菌：空气系统、冷水设备渗漏。 对右图中代谢变化曲线中各曲线的变化情况进行描述，并结合图示说明不同补料方式对青霉素合成的影响及影响的主要原因。 1、图中有三组曲线，分别为补糖曲线、pH变化曲线和青霉素的效价曲线，其中每组曲线中，实线的补糖方式为恒速补糖，虚线的补糖方式为按需补糖 整个过程中，pH变化均维持在6.5-7之间。 采用恒速补糖方式进行补糖时，从发酵约20小时开始补糖，补糖速度恒定至发酵结束。采用按需补糖方式补糖时，每次pH值开始上升后增加补糖量，后期降低时减少补糖量。整个过程中，两种方式补糖总量相等。 两种方式补糖后，青霉素效价的变化情况为：100h之前，发酵产生的青霉素效价基本一致，均快速上升，100h之后，恒速补糖的青霉素效价增长减缓，而按需补糖的青霉素效价仍保持快速增长。整个发酵过程中，按需补糖方式产生的青霉素效价明显高于恒速补糖方式产生的青霉素效价。 答：1）发酵前期，溶氧迅速下降，出现一个低峰。随后，溶氧开始趋于平稳，并维持一段时间，至发酵约30h时，溶氧迅速上升。 发酵前期，溶氧迅速下降阶段，菌体大量繁殖，需氧量迅速增加，好氧量超过供氧量，使溶氧浓度明显下降。 溶氧平稳阶段，由于菌体已经繁殖到一定浓度，进入静止期，呼吸强度变化不大，耗氧量与供氧量几乎相等，供氧能力保持不变，溶氧浓度变化也不大。 溶氧迅速回升阶段，菌体衰老，呼吸强度降低，耗氧量低于供氧量，使溶氧上升，一旦菌体自溶，溶氧浓度更会明显上升。 2）异常曲线，前期溶氧迅速下降，出现低峰后，迅速回升；发酵液的光密度值在8-15h之间，上升，之后开始下降。 出现该现象的原因可能是：污染烈性噬菌体，使产生菌菌体溶溃，溶氧上升，光密度下降。 描述下图中代谢曲线的变化情况，说明不同碳源种类对青霉素合成的影响及控制办法。 答：1、图中包含两组曲线，一组曲线为青霉素发酵过程中糖代谢曲线，另一组为发酵过程中产生的青霉素效价曲线。每组曲线包含3条，分别为葡萄糖作为碳源的代谢曲线、乳糖作为碳源的代谢曲线和不加碳源的代谢曲线。 1）、以3%葡萄糖为碳源的发酵中，残糖浓度随发酵时间延长逐渐降低且降低速度较快，大约在40h时，残糖浓度降至最低，产物青霉素于18h出现，合成量较少。 2）、以3%乳糖作为碳源的发酵中，发酵前期残糖浓度基本不变，至发酵20h时，开始减少，但减少速度缓慢，产物青霉素于20h出现，效价