四川省岳池县第一中学2014-2015学年高中生物专题5课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段学案新人教版选修1..doc

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四川省岳池县第一中学2014-2015学年高中生物专题5课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段学案新人教版选修1.

多聚酶链式反应扩增DNA片段 学习目标1.了解PCR技术的基本操作 2.理解PCR的原理 3.讨论PCR的应用 学重点学点 课前预习 使用说明与学法指导 据学习目标,认真预习课本,用红笔标注重点与难点15分钟完成课前预习内容。 知识准备 教材助读) 变性:在 ℃时DNA解旋 复性:在 ℃时引物与DNA单链结合 延伸:在 ℃时合成DNA子链(两个引物间的序列) 三、实验操作 在实验室中,做PCR通常使用 ,它是一种薄壁塑料管。具体操作时,用微量移液器,按PCR反应体系的配方在 中依次加入各组分,再参照课本P62表的设置设计好PCR仪的循环程序即可。 四、操作提示 (1)、为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的 、 、 以及蒸馏水等在使用前必须进行 。 (2)、PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份,并在 储存。使用前,将所需试剂从冰箱拿出,放在冰块上缓慢融化。在微量离心管中添加反应成分时,移液管上的枪头要 。 预习自测题 1.DNA的3’端是( ),5’是( ) A.羟基末端 B.磷酸基团的末端 2. PCR的反应过程叙述正确的是( ) A.延伸-----变性----- 复性 B.延伸----复性------ 变性 C.变性-----复性----- 延伸 D.变性-----延伸----- 复性 我的疑问 学始于疑课内探究探究一 (3)第一轮循环之后的结果是什么? (4)细胞内DNA复制和细胞外PCR扩增的比较 DNA复制 PCR扩增 不同点 场所 能量 酶 是否需要加入引物 是否需缓冲液 设备 相同点 原料 复制原理 模板 引物 探究二请将学习总结写在下面 - 5 - 变性 复性 延伸 多聚酶链式反应扩增DNA片段 PCR原理 DNA的复制需要酶、原料、能量、引物 DNA的变性和复性受温度影响 PCR过程 变性 复性 延伸 操作步骤 配制PCR反应体系 移入离心管 放入PCR 设置工作参数 DNA扩增 测定含量 稀释 调零 测定并读数 计算

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