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四川省岳池县第一中学2014-2015学年高中生物专题5课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段学案新人教版选修1.
多聚酶链式反应扩增DNA片段
学习目标1.了解PCR技术的基本操作
2.理解PCR的原理
3.讨论PCR的应用
学重点学点
课前预习
使用说明与学法指导
据学习目标,认真预习课本,用红笔标注重点与难点15分钟完成课前预习内容。
知识准备
教材助读)
变性:在 ℃时DNA解旋
复性:在 ℃时引物与DNA单链结合
延伸:在 ℃时合成DNA子链(两个引物间的序列)
三、实验操作
在实验室中,做PCR通常使用 ,它是一种薄壁塑料管。具体操作时,用微量移液器,按PCR反应体系的配方在 中依次加入各组分,再参照课本P62表的设置设计好PCR仪的循环程序即可。
四、操作提示
(1)、为避免外源DNA等因素的污染,PCR实验中使用的 、 、 以及蒸馏水等在使用前必须进行 。
(2)、PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份,并在 储存。使用前,将所需试剂从冰箱拿出,放在冰块上缓慢融化。在微量离心管中添加反应成分时,移液管上的枪头要 。
预习自测题
1.DNA的3’端是( ),5’是( )
A.羟基末端 B.磷酸基团的末端
2. PCR的反应过程叙述正确的是( )
A.延伸-----变性----- 复性 B.延伸----复性------ 变性
C.变性-----复性----- 延伸 D.变性-----延伸----- 复性
我的疑问
学始于疑课内探究探究一
(3)第一轮循环之后的结果是什么?
(4)细胞内DNA复制和细胞外PCR扩增的比较
DNA复制 PCR扩增
不同点 场所
能量
酶
是否需要加入引物 是否需缓冲液 设备
相同点 原料
复制原理
模板
引物
探究二请将学习总结写在下面
- 5 -
变性
复性
延伸
多聚酶链式反应扩增DNA片段
PCR原理
DNA的复制需要酶、原料、能量、引物
DNA的变性和复性受温度影响
PCR过程
变性
复性
延伸
操作步骤
配制PCR反应体系
移入离心管
放入PCR
设置工作参数
DNA扩增
测定含量
稀释
调零
测定并读数
计算
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