外周血rna提取 外周血白细胞RNA提取并RT-PCR实验技术.doc

外周血rna提取 外周血白细胞RNA提取并RT-PCR实验技术 导读：就爱阅读网友为您分享以下“外周血白细胞RNA提取并RT-PCR实验技术”的资讯，希望对您有所帮助，感谢您对92的支持! 外周血（静脉血）白细胞RNA提取 1ml外周血中加入3ml红细胞裂解液 ↓ 颠倒混匀，室温放置5min ↓ 3000rpm离心5min ↓ 弃上清。留下白细胞沉淀（或者1：1的比例裂解，重复三次） ↓ 加入1ml Trizol裂解白细胞 ↓ 用枪将其移至EP管中反复吹打至完全分散 ↓ 用5ml注射器反复吹打（不少于10次） ↓ 再用1ml注射器反复吹打 ↓ 加入1/5总体积的氯仿（200ul），颠倒混匀，室温放置5min ↓ 4离心：12000rpm 15min ↓ 转上层水相450ul于另一个EP管中，加入等体积的异丙醇（一师兄建议加异丙醇后-80过夜沉淀RNA，-20也可。RNA产出浓度为200-300ng/μl,100μl稀释）， 混匀，静置15min ↓ 4离心：12000rpm 10min