蛋白质含量测定方法 Bradford法测定牛奶中蛋白质含量_张志涛.doc

蛋白质含量测定方法 Bradford法测定牛奶中蛋白质含量_张志涛 第２７卷第５期２０１１年９ 月 ／．ｉｓｓｎ．１００３－５７８８．２０１１．０５．０３３１０．３９６９ｊ Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．５２０１１Ｓｅ ｐ． Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测定牛奶中蛋白质含量 ＰｒｏｔｅｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍｉｌｋｂＢｒａｄ… 实用CISCO路由器 一、CISCO分层模型 1、核心层（core layer） 提供高速宽带的骨干传输，主要功能是尽可能快速地交换数据。该层不实施任何过滤功能，以免降低数据传输速率。 有12000、7500、7200、7000系列路由器（Catal… GY-26电子指南针使用手册（IIC+串口） 一、概述 GY-26是一款低成本平面数 字罗盘模块。输入电压低，功 耗小，体积小。其工作原理是 通过磁传感器中两个相互垂直 轴同时感应地球磁场的磁分量， 从而得出方位角度，此罗盘以 RS232协议，及II… 第２７卷第５期２０１１年９ 月　　　 ／．ｉｓｓｎ．１００３－５７８８．２０１１．０５．０３３１０．３９６９ｊ Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．５２０１１Ｓｅ　　　ｐ． Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测定牛奶中蛋白质含量 ＰｒｏｔｅｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍｉｌｋｂＢｒａｄｆｏｒｄｍｅｔｈｏｄ　　　　　ｙ　张志涛 刘金生 许　强 孙晓萌 王轶鹏 　　　　 ｅｎＺＨＡＮＧ　ＺｈｉｔａｏＬＩＵ　Ｊｉｎ－ｓｈｅｎＱｉａｎＵＮ　Ｘｉａｏ－ｍｅｎＹｉ－－ｇＸＵ　ｇＳｇＷＡＮＧ　ｐｇ （）山东省医学科学院基础医学研究所，山东济南　２５００６２ （ＤｅａｒｔｍｅｎｔｏＢａｓｉｃ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ＳｈａｎｄｏｎＡｃａｄｅｍｏＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｊｉｎａｎ，Ｓｈａｎｄｏｎ２５００６２，Ｃｈｉｎａ）　　ｐｆ　ｇ　ｙｆ　ｇ，　 摘要：采用Ｂｒａｄｆｏｒｄ法与传统的凯氏定氮法测定牛奶中蛋白质含量并进行比较，成本低廉。通过Ｂｒａｄｆｏｒｄ法方便快捷，添加的尿素或者三聚氰胺对测定无影响，与试验对比验证， 微量凯氏定氮法比较，两者的结果有相关性。 关键词：微量凯氏定氮法；蛋白质含量；尿素；三Ｂｒａｄｆｏｒｄ法；聚氰胺 ：ＡｂｓｔｒａｃｔＰｒｏｔｅｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｍｉｌｋＣｏｎｖｅｎｉｅｎｔｌａｎｄｒａｉｄｌｂ　　　　　ｙｐｙｙ　　Ｂｒａｄｆｏｒｄｍｅｔｈｏｄ．Ａｄｄｅｄｕｒｅａａｎｄｍｅｌａｍｉｎｅａｒｅｎｏｔｅｆｆｅｃｔｅｄｒｏｔｅｉｎ　　　　　　　　ｐｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＢｒａｄｆｏｒｄａｎｄＫｅｌｄａｈｌｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　　　　　　ｊｃｏｒｒｅｌａｔｉｖｅ．ａｒｅ　 ：；ｍ；；ｒｏｔｅｉｎＫｅｗｏｒｄｓＢｒａｄｆｏｒｄｉｃｒｏＫｅｌｄａｈｌｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｃｏｎｔｅｎｔｕ　　ｐｊｙ－；ｒｅａｍｅｌａｍｉｎｅ 白质含量的快速测定。 １　材料与方法 试剂与仪器１．１　材料、 牛奶：购于济南； 染色剂：考马斯亮蓝，称取１００ｍ２５０－ｇ考马斯亮蓝Ｇ染料溶于５再加１用０ｍＬ９５％的乙醇后，２０ｍＬ８５％磷酸，　　水稀释定容到１Ｌ。 ／混合指示剂：１０ｍＬ１ｇＬ的甲基红乙醇溶液与５ｍＬ　／１ｇＬ的亚甲基蓝乙醇溶液混合。 ／盐酸标准滴定液：０．０５３０ｍｏｌＬ。　 ／标准蛋白质溶液：１．０ｍｍＬ的牛血清白蛋白；ｇ尿素、三聚氰胺、硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸、硼酸、氢氧化皆为国产分析纯；钠、９５％乙醇： 可见分光光度计：上海精密科学仪器有限公司；７２２Ｎ，凯氏定氮仪：江苏江都市红旗玻璃厂； 分析天平：奥豪斯国际贸易（上海）有限公司。ＡＲ１１４０，１．２　方法 干扰品制备　用水将牛奶稀释得５１．２．１　样品、０倍牛奶稀／释样品；另取部分稀释液加入尿素使之浓度为０．２ｍｍＬ，ｇ／再取部分稀释液加入三聚氰胺使之浓度为０．５ｍｍＬ。ｇ１．２．２　Ｂｒａｄｆｏｒｄ法操作步骤 （）标准曲线的制作：取７支试管，依次加入０，１０．０１，／０．０２，０．０４，０．０６，０．０８，０．１０ｍＬ的１．０ｍｍＬ标准蛋白质ｇ用水补充到０．最后加入５．溶液，１ｍＬ，０ｍＬ考马斯亮蓝染色剂，每加完１管立即混匀。反应２～５ｍ以０管ｉｎ后比色，调零，于５并制作标准曲线。９５ｎｍ波长测定各管吸光度， （）待测管：取３第一组加入０．２０支试管分为３组，１ｍＬ 三聚氰胺事件引发的食品安全问题已经影响了整个食 １］ 。三聚氰胺又名假蛋白，属于非蛋白质含氮化合品行业［ 物，属于难代谢物质，如果进入人和动物体内能不同程度的还能导致结石诱发膀胱和泌尿系统疾导致肾衰竭或者死亡， ２］ ，病［因此对牛奶中的蛋白质测定也提出了更高的要求。经 典的食品蛋白质（包括牛奶）含量的测定，方法繁琐，耗时