流式细胞术报告单解读-1.ppt

流式细胞术 细胞染色，制备单细胞悬液 上机获取数据 数据分析 PMT PMT PMT PMT 4 Dichroic Filters Bandpass Filters 流式细胞检测原理 Laser 1 2 3 4 Flow cell 流式数据表现形式 FS:细胞大小 SS:胞内颗粒性 流式血液肿瘤数据分析步骤 1 、寻找异常细胞 2、 定义异常细胞 --异常细胞是什么细胞？ --异常细胞的量有多少？ 3、结论 如何寻找异常细胞? 正常细胞群的分布 粒细胞 单核细胞 淋巴细胞 CD45:白细胞共同抗原，表达于所有白细胞 异常细胞群 异常细胞群 异常细胞的量如何计算? 流式如何定义细胞? --以白血病细胞表达的抗原标志作为依据 粒细胞成熟过程 阶段 表达 不表达 I 原粒 CD45+CD34++CD117++DR+ CD13++CD33++ CD15,CD11b,CD16, CD10 II 早幼粒 CD45+CD117++CD13++CD33++ CD15++ CD34, HLA-DR, CD11b,CD16 III 中幼粒 CD45+CD13+CD33+ CD15++CD11b++ CD34, CD117, DR, CD16 IV 晚幼粒 CD45+CD13++CD33++ CD15++CD11b++CD16+ CD34, CD117, DR, CD10 V 成熟粒 CD45++CD13++CD33++ CD15++CD11b++CD16++CD10++ CD34, CD117,DR 不同阶段粒细胞CD分子的表达情况 单核细胞的成熟过程 不同阶段单核细胞CD分子的表达情况 阶段 表达 不表达 I 原单 CD45+CD34++CD117++ DR++CD13++CD33++ CD11b, CD14,CD15 II 幼单 CD45+DR++CD34+/CD117+/- CD13+++CD33+++ CD11b++CD15+ CD34, CD117, CD14 III 成熟单 CD45++ DR++ CD13+++CD33+++CD11b++ CD15+CD14++ CD34,CD117 红系的成熟过程 阶段 表达 不表达 I 原红 CD45+CD71++CD117+ Glycophorin A (CD235a) II 有核红 CD71++Glycophorin++ CD45 III 成熟红 Glycophorin+ CD45, CD71 B淋巴细胞成熟过程 T淋巴细胞的成熟过程 其他血液系统肿瘤的特异性标志 毛细胞性白血病：CD19+，CD103+， CD11c/CD22双阳性高表达 CLL：CD19+/CD5+ CMML：CD14+/CD68+/CD13+CD33+/高SSC MM：CD19+，CD38+ 流式报告单的结论如何得出? 病例分析 病例一 异常细胞 髓系？淋系？ 流式细胞术检测结果表明骨髓细胞中髓系母细胞（CD34+或/和CD117+）约占骨髓细胞总数32%；同时伴有单核细胞系列分化倾向的细胞约占骨髓细胞总数约70%。结果符合急性髓性白血病伴单核细胞系列分化（AML-M5）。『因为原始单核细胞＋幼稚单核细胞大于等于80％为M5a,x小于80％为M5b』，在分界线上，所以不区分a,b.治疗方法类似。 淋巴细胞------4.2 T细胞占淋巴细胞44.9%，CD4:CD8=0.66，未见明显异常；NK细胞占淋巴细胞3.9%，未见明显异常；成熟B细胞占淋巴细胞40.7%，为多克隆B细胞,未见明显异常。 粒细胞--------22.7 相对比例未见明显减少。免疫表型提示粒细胞发育成熟标记物表达紊乱。 单核细胞------37.7 相对比例明显增多，其中约70%为成熟单核细胞，免疫表型为CD14+,CD64+,CD11b+, CD13+,CD33+,HLA-DR+和CD4+。 CD45 Dim------33.0 相对比例明显增多，为髓性原始/幼稚细胞,免疫表型为CD34+，CD117+，CD13+,CD33+和HLA-DR+。 非白细胞-----0.2 未见明显异常。 病例二 淋巴细胞------41.5 T细胞占淋巴细胞70.9%，CD4:CD8=1.42，未见明显异常；NK细胞占淋巴细胞4.7%，未见明显异常；成熟B细胞占淋巴细胞17.6%，为多克隆B细胞,未见明显异常。 粒细胞--------10.9 其相对比例明显减低，免疫表型未见明显异常。 单核细胞------4.9 未见明显异常。