临床微生物学检验重点 临床微生物学检验期末重点!!!.doc

临床微生物学检验重点 临床微生物学检验期末重点!!! 导读：就爱阅读网友为您分享以下“临床微生物学检验期末重点!!!”资讯，希望对您有所帮助，感谢您对92的支持! 不染色标本检查法：是将细菌标本不经染色直接镜检，从而观察生活状态下细菌的形态及运动状况的一种检查方法。主要用于观察细菌的动力。常用方法：1、悬滴法：观察自然状态下需氧菌和兼性厌氧菌的动力。2、压滴法：观察需氧菌和兼性厌氧菌的动力。 按电离后染料离子的性质分类：（1）、碱性染料：此类染料电离时，染料离子带正电荷。如美兰。（2）、酸性染料：酸性染料电离时，染料离子带负电荷。如伊红。 细菌的常用染色法：革兰染色、抗酸染色、荧光染色、鞭毛染色、荚膜染色。 革兰氏染色法：【原理】（1）革兰阳性细菌细胞壁结构较致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易渗入；革兰阴性菌细胞壁结构较疏松，肽聚糖层少，脂质含量多，乙醇易渗入。（2）革兰阳性菌的等电点低，革兰阴性菌的等电点较高，在相同pH条件下，革兰阳性菌所带负电荷比革兰阴性菌多，与带正电荷的结晶紫染料结合较牢固不易脱色。（3）革兰阳性菌细胞内含有大量核糖核酸镁盐，可与结晶紫和碘牢固的结合成大分子复合物，不易被乙醇脱色；而革兰阴性菌细胞内含极少量的核糖核酸镁盐，吸附染料量少，形成的复合物分子也较小，故易被乙醇脱色。【步骤】：涂片 → 固定 → （媒染）→ 染色→ （脱色）→（复染）。【结果】:紫色为革兰阳性菌，红色为革兰阴性菌。 革兰氏染色的三个原理，操作步骤与临床意义:1、原理（1）渗透学说：革兰阳性菌细胞壁结构较紧密，肽聚糖层厚，含脂质少，脱色时乙醇不易渗入，反而使细胞壁脱水，通透性下降，胞内结晶紫与碘的复合物不易渗出。格兰阴性菌细胞壁结构较疏松，肽聚糖层薄，含脂质多，易被乙醇溶解，是细胞壁通透性增加，胞内结晶紫与碘的复合物易被乙醇溶解溢出而被脱色。【主要学说——细胞壁结构学说：G+菌和G-菌的细胞壁成分差异大，对脱色剂的反应不同】（2）化学学说：革兰阳性菌含大量核糖核酸镁盐可与结晶紫、碘牢固结合，而不易被乙醇脱色。革兰阴性菌内所含核糖核酸镁盐少，故易被脱色。（3）等电点学说：革兰阳性菌的等电点（pH2~3）比格兰阴性菌（pH4~5）低，在相同pH的条件下，革兰阳性菌比格兰阴性菌所带的负电荷多，与带正电荷的碱性染料结合较牢固，而不易脱色。2、操作步骤：细菌涂片、干燥，经火焰固定（菌膜gt;1cmX1cm）结晶紫染色1min，水洗甩干 加碘液媒染1min，水洗甩干 加95%乙醇脱色30s，水洗甩干 用稀释复红或沙黄复染30s，水洗吸干后镜检3、临床意义：鉴别细菌 选择治疗用药 与细菌致病性有关抗酸染色：【原理】分枝杆菌细胞壁含脂质较多，其中主要成分为分枝菌酸，此物具有抗酸性，染色时与石炭酸复红结合牢固，能抵抗酸性乙醇的脱色作用，因此抗酸菌能保持复红的颜色，达到染色目的。 【结果】：未脱色细菌呈红色为抗酸性细菌,脱色经复染呈蓝色的细菌为非抗酸性细菌。 发色团：分子结构的某些基团吸收某种波长的光，而不吸收另外波长的光，从而使人觉得好像这一物质”发出颜色”似的，因此把这些基团称为”发色基团/发色团”。 助色基：带有“色基”的苯衍生物叫“色原”或“色原物”。“色原”虽有色，但不一定能和被染物结合而着色，常需在染料分子中加上一个能电离的基团，使其能生成盐类而与被染物结合着色。这种结合在色原物上、能电离的化学基团称“【助色基】”或“【助色团】”。 细菌的生化反应：是指利用生物化学的原理，来测定细菌对各种物质的代谢能力、代谢途径、代谢方式以及代谢产物的不同，从而对细菌进行鉴别鉴定的方法。 碳水化合物的代谢试验：糖醇类发酵试验；葡萄糖氧化/发酵试验（O/F）；甲基红试验（MR）；V—P试验；β-半乳糖苷酶试验（ONPG）；七叶苷水解试验。 蛋白质和氨基酸的代谢试验：吲哚（靛基质）试验；硫化氢试验；尿素分解试验；苯丙氨酸脱氨酶试验；氨基酸脱羧酶试验；明胶液化试验。 碳源和氮源利用试验：枸橼酸盐利用试验；丙二酸盐利用试验。 各种酶类试验：氧化酶试验；过氧化氢酶试验（触酶试验）；硝酸盐还原试验；脂酶试验；卵磷脂酶试验；DNA酶试验；凝固酶试验；CAMP试验；胆汁溶菌试验。 抑菌试验：O/129抑菌试验；杆菌肽试验；奥普托欣试验(Optpchin)。 IMViC试验：I——吲哚试验 M——甲基红试验 V——V-P试验 C——枸橼酸盐试验 糖（醇、苷）类发酵试验：【原理】各种细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类的酶，并且细菌对糖类分解后产生不同种类和数量的酸类或CO2，可根据此特点来鉴别细菌。【方法】根据待检菌的鉴别要求选用合适的含有糖类（单糖、双糖或多糖）、醇类（甘露醇、肌醇等）、苷类（水杨苷、菊糖等）的培养基，将待检菌接种经培养后观察结果。【结果】