不同富集花椒籽油中α..doc

不同富集花椒籽油中α-亚麻酸方法间的比较 摘要：通过实验对富集花椒籽油中α-亚麻酸的工艺进行了比较研究，得出在花椒籽油中提取α-亚麻酸的不同方法的最佳实验条件，并比较得出相对最佳的富集纯化方法；同时利用各种方法之间的互补特性，得出相对最佳的从花椒籽油中分离富集α-亚麻酸的技术方法和工艺路线。 关键词：花椒籽油、α-亚麻酸、富集、优化。 引言：花椒籽含丰富油脂, 作为花椒的副产品, 其来源丰富, 价格低廉, 是极具开发潜力的油脂资源. 据测定,花椒籽中含有27% ~ 31%的油脂,其中不饱和脂肪酸含量为87. 9% ~ 90. 0%, 尤其是α-亚麻酸的含量可达25%~ 33%,α-亚麻酸是人体自身不能合成的必需氨基酸之一，α-亚麻酸及其在肝脏内转化成的衍生物DHA等有降血压、血脂、维护微血管壁弹性及其完整性、抑制过敏、提高免疫力、抗癌、抑制肿瘤等诸多功能。医学和营养学专家根据人群膳食结构的流行病学调查证实：人类普遍缺乏α-亚麻酸，日摄入量不足世界卫生组织推荐量（1.25）的一半。因此，研究得出相对最佳的富集α-亚麻酸方法对人类健康具有很重要的意义。同时对花椒籽油的深加工也延长和完善了花椒产业链，积极推进了传统花椒产业的现代化。 α-亚麻酸富集纯化的方法主要有分子蒸馏法、超临界流体萃取法、尿素包合法、银离子络合法、柱色谱法、低温结晶法、吸附分离法、脂肪酶浓缩法等。下面通过对常用的尿素包合法、超临界流体萃取法、低温结晶法、分子蒸馏法等四种方法进行比较，从而得出相对最佳的富集方法。 一、尿素包合法 1.仪器与药品 恒温水浴箱: HH22 金坛富华仪器有限公司； 真空旋转蒸发仪: SHZ2C 巩义市英峪予华仪器厂; 电动搅拌器: D12022J 杭州仪表电机厂; 岛津GC29A 气相色谱仪: 日本Shimadzu 公司; 数据处理机: C2R3A 日本Shimadzu 公司。 脂肪酸甲酯标准样购自Sigma 公司, 花椒籽油由韩城市金太阳油脂厂提供, 其余试剂均为分析纯。 2. 制备游离的混合脂肪酸 精密称取花椒籽油按一定比例加入1 mol/ L 氢氧化钾2乙醇溶液, 充氮水浴加热回流0. 5~ 1 h, 再加入石油醚除去不皂化物, 冷却、过滤得皂化物; 加适量水溶解皂化物. 用10% 稀盐酸调节pH= 1~ 2, 充分搅拌, 静置分层, 分取上层油状液体; 水层用石油醚萃取3 次, 并入油状液体并水洗其至中性, 无水硫酸钠干燥, 回收石油醚, 即为混合游离脂肪酸. 3. 进行尿素包合 按一定配比将尿素和甲醇一并置入三口烧瓶中, 开启磁力搅拌, 70 e 水浴锅中回流至尿素充分溶解,再加入一定量的混合脂肪酸, 继续回流至澄清透明. 在一定温度下结晶包合一定时间后, 迅速减压抽滤, 用95% 的乙醇洗结晶体. 滤液中加入适量石油醚, 用10% 的HCl 溶液酸化滤液至pH= 2~ 3, 加入适量水充分萃取, 去下层的水层, 将有机相水洗至中性, 加入无水硫酸钠脱水, 抽滤, 回收溶剂, 得到富集的不饱和脂肪酸。 4. 正交试验设计 设尿素加入量、溶剂、温度、时间4个因素, 每个因素选3个水平进行正交试验, 结果见表2、表3. 表2 正交试验因素水平表 水平 A.花椒籽油：尿素 B.游离脂肪酸：甲醇 C.包合时间(h) D.包合温度(e) 1 1:1 1:8 16 -10 2 1:2 1:9 17 -5 3 1:3 1:10 18 0 5. 甲酯化反应 为了使制得的高纯度A2亚麻酸更加稳定,我们将其制成稳定的脂肪酸甲酯. 将包合后的脂肪酸加入2%的H2SO42CH3OH 溶 实验 A B C D α-亚麻酸含量（%） 1 1 1 1 1 46.31 2 1 2 2 2 59.10 3 1 3 3 3 54.24 4 2 1 2 3 66.65 5 2 2 3 2 59.05 6 2 3 1 1 54.53 7 3 1 3 2 68.87 8 3 2 1 3 64.16 9 3 3 2 1 60.27 液, 水浴70 e 充氮加热回流2h 至 表3 正交试验结果 反应完全, 回收甲醇, 加入石油醚萃取, 分取醚层, 水洗, 无水硫酸钠干燥, 充氮减压回收石油醚, 即得高纯度的α-亚麻酸甲酯. 6. α-亚麻酸含量的测定 采用气相色谱法测定α-亚麻酸含量 . 测定结果以峰面积归一化法计算α-亚麻酸的含量. 7.结论与分析 ( 1) 在A3B1 C3 D2 条件下, A2亚麻酸含量最高, 故选择A3B1C3D2 为合适的包合反应条件, 即: 尿素：花椒籽油为3 ：1, 游离脂肪酸：乙醇为1:8, 包合温度为- 5 e