心脑联通片质量标准研究..doc

心脑联通片质量标准的研究 严亚锋 （陕西中医学院，陕西 咸阳 712046） 摘要： 目的 建立心脑联通片的质量标准。方法 采用TLC法鉴别方中灯盏细辛、葛根、丹参和刺五加，采用HPLC法测定灯盏细辛中野黄芩苷的含量。结果 灯盏细辛、葛根、丹参和刺五加TLC色谱斑点清晰，无干扰，野黄芩苷在21.62～108.20ug/ml范围内线性关系良好（r=0.9997），平均加样回收率为98.22%，RSD=0.38%。结论 所建立的薄层鉴别方法斑点清晰、专属性强、重现性好，含量测定方法分离度好、结果准确，可有效控制心脑联通片的质量。 关键词：心脑联通片；野黄芩苷；灯盏细辛；葛根；丹参；刺五加；TLC；HPLC 心脑联通片是由国家食品药品监督管理局《国家中成药标准汇编》心系分册“心脑联通胶囊”[WS-10031(ZD-0031)-2002]改剂型而来，处方由灯盏细辛、虎杖、野山楂、柿叶、刺五加、葛根和丹参七味中药组成，具有活血化瘀，通络止痛的功效。用于瘀血闭阻引起的胸痹，眩晕，症见胸闷，胸痛，心悸，头晕，头痛耳鸣等，以及冠心病心绞痛，脑动脉硬化及高脂血症见上述证候者[1]。本文对方中灯盏细辛、葛根、丹参和刺五加采用TLC法进行了鉴别研究[2-5]，对灯盏细辛所含野黄芩苷采用HPLC法进行含量测定研究[6-7]，该薄层鉴别方法和含量测定方法简便、准确、专属性强，可有效保障心脑联通片的质量。 仪器与试药 1.1 仪器：LC-10ATvp液相色谱仪（日本岛津）；SPD-10Avp紫外检测器（日本岛津）；CS-Light中文色谱软件；ZF-7型暗箱式三用紫外分析仪。 1.2 试药：野黄芩苷对照品（批号为110842-200605）；葛根素对照品（批号为110752-200511）；丹参酮ⅡA对照品（批号为110766-200518）；刺五加对照药材（批号为120991-200405），均由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯；水为重蒸馏水；心脑联通片自制(批号：120301、120302、120303)；其他试剂均为分析纯。 方法与结果 2.1薄层色谱鉴别 2.1.1灯盏细辛薄层色谱鉴别 取本品4片，除去衣，研细，称取1g，加70%乙醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液挥至近干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液用醋酸乙酯提取3次，每次20ml，弃去醋酸乙酯液，水层用稀盐酸调节PH值至2～3，再用醋酸乙酯提取2次，每次15 ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2 ml使溶解，作为供试品溶液。另取缺灯盏细辛的阴性样品1g，同法制成阴性对照溶液。再取野黄芩苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照在与对照品色谱相应的位置上无干扰。 见图1。 1 2 3 4 5 1～3.供试品 4. 野黄芩苷对照品 5. 阴性对照溶液 图1 灯盏细辛薄层色谱图 2.1.2葛根薄层色谱鉴别 取本品4片，除去衣，研细，称取1g，加75%乙醇30ml，回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，滤过，滤液加于聚酰胺柱（5g, 内径约1cm, 先用乙醇50 ml洗脱，再用水300ml洗脱）上，依次用10%乙醇30ml、40%乙醇30ml洗脱，收集40%乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，加中性氧化铝2g，拌匀，挥干，加于中性氧化铝柱（5g, 内径约1cm）上，用50%甲醇70ml洗脱，前25ml弃去，收集后40ml洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取缺葛根的阴性样品1g，同法制成阴性对照溶液。再取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-氯仿-甲醇-水-冰醋酸（6:2:2:2:0.05）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照在与对照品色谱相应的位置上无干扰。见图2。 1～3.供试品 4. 葛根素对照品 5. 阴性对照溶液 图2 葛根薄层色谱图 2.1.3丹参薄层色谱鉴别 取本品8片，除去衣，研细，称取2.5g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml，加热使溶解，放冷，用石油