快速测定酿酒原辅料及白酒中氯化苦的残留量..docx

快速测定酿酒原辅料及成品中氯化苦的残留量—气质联用法摘要：本文建立了一种气质联用法中以选择离子的扫描模式对酿酒常用的原辅料和白酒成品中氯化苦残留量的进行检测的分析方法，在20—2000ug/l范围之内，线性关系良好，相关系数0.9992，回收率91—110%之间。以3倍信噪比来计算，仪器的检测限可达5ug/l。本方法采用了传输线温度进行程序升温的方式和选择m/z119为定量离子，大大减少了样品的干扰。 氯化苦是一种有警戒性的薰蒸剂，可以杀虫、杀菌、杀鼠，也可用于粮食害虫薰蒸，还可用于木材防腐、房层、船舶消毒，土壤、植物种子消毒等。无色或微黄色油状液体，有催泪性，氯化苦易挥发，扩散性强，挥发度随温度上升而增大。它所产生的氯化苦蒸汽比空气重5倍。温度高时，药效显著，一般在20°C熏蒸比较合适。目前测定粮食中氯化苦残留规定使用的是分光光度法（GB/T 5009.36），此方法操作较为繁琐，提取时间长。测定过程中使用的是比色法，所以干扰较大，易造成假阳性或假阴性，结果不准确。使用气相色谱法，检测器为ECD，提取方法常使用的是流速回流和石油醚提取法，但均比较繁琐，虽然ECD检测器的检测灵敏度很高，但其定性仅依靠峰的保留时间，有可能造成假阳性。 本文以气相色谱-质谱联用法选择离子模式对酿酒常用的原辅料（小麦、高粱、大米、糯米、玉米、糠壳等）及不同香型的白酒中氯化苦的残留量进行研究分析，进而加强食品安全的控制。1 材料与方法1.1 试剂无水乙醇（色谱纯）；100ug/ml氯化苦标准品1.2 样品生产用五种粮食与糠壳；市售各种香型白酒1.3 仪器安捷伦GC7890/MS5975C气质联用仪；色谱柱：hp-5ms Agilent 30m*0.25mm*0.25um ； 超声波提取仪；1.4 方法条件 进样口温度：160℃；进样量:1ul;柱流速：恒流1.0ml/min;分流模式：分流比：8:1；传输线温度：220℃（保持6min）以20℃/min升温至280℃（保持10min）；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；数据采集模式：选择离子 M/Z 117、M/Z 119、M/Z 121，其中M/Z 119作为定量离子；柱温程序升温：40℃（保持2min）以5℃/min升温至70℃（保持0min）再以20℃/min升温至280℃（保持1.5min）。1.5 定性定量方法 定性分析:经气相色谱分离形成其的色谱峰,用GC-MS 联用仪进行分析鉴定。各组分质谱经计算机谱库(NIST08) 检索及资料分析,再结合有关文献进行人工谱图解析,确认物质的化学结构。同时结合标准品进行保留时间和碎片离子的确认鉴定。定量分析：由于在白酒中的微量成分很复杂，易出现干扰离子，影响定量结果，所以在本方法中采用氯化苦的特征离子m／z119进行定量。从样品质量色谱图提取特征离子m/z119的峰面积，通过标准曲线回归方程进行计算出待测样品中氯化苦的残留量。2 分析步骤2.1 标准曲线的配制 使用100mg/l的氯化苦标准溶液分别稀释成20ug/l、50ug/l、100ug/l、500ug/l、1000ug/l、2000ug/l的标准系列，稀释溶剂采用无水乙醇。在1.4的方法条件下上机检测。该标准曲线以氯化苦浓度为横坐标，以M/Z117的峰面积为纵坐标。2.2 样品测定2.2.1 将酿酒常用的原辅料（小麦、高粱、大米、糯米、玉米、糠壳等）粉碎后，混匀。分别称取5.00g加入具塞20ml试管中，再准确量入5ml无水乙醇，摇匀后放入超声波提取仪中超声提取20min；使用0.25um滤膜过滤后直接进样检测分析。2.2.2 白酒直接进样。3 结果与讨论3.1 标准曲线 根据上述1.4与2.1的分析，经数据处理后得回归方程为y=0.6741x+9.927，R=0.99924，标准曲线的线性范围20—2000ug/l。以3倍信噪比来计算，仪器的检测限为5ug/l。标准回归曲线图见图1。图1： 氯化苦的标准曲线图3.2 氯化苦的色谱、质谱图按照上述的方法条件，使用2000ug/l的标准溶液进行全扫描模式检测，经计算机谱库(NIST08) 检索氯化苦的相似度为95，色谱图和质谱图见图2和图3图2:2000ug/l的氯化苦标准品SCAN色谱图图3:2000ug/l的氯化苦标准品质谱图3.3 样品中氯化苦的测定3.3.1 白酒中氯化苦定量离子的选择 参照相关文献中测定氯化苦时选择的定量离子为M/Z117，但由于白酒中微量成分的复杂性，在本文中为避免样品中的干扰离子，经过分析后，选择定量离子为m/z119。如下图4、图5 图4： m/z119 色谱图 图5： m/z117 色谱图 可根据图4和图5看出，不同的定量离子其样品中的干扰离子差异很大，氯化苦的保留时间4.948