实验一紫外分光光度法测定苯甲酸分析.ppt

紫外分光光度法测定苯甲酸 一 实验目的 学习运用标准对比法求样品含量 掌握752型紫外分光光度计的使用方法 二 实验原理 在碱性条件下，苯甲酸形成苯甲酸盐，对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm。可采用紫外分光光度计测定物质在紫外光区的吸收光谱并进行定量分析。 三 实验步骤 1.苯甲酸吸收曲线的绘制 吸取苯甲酸贮备液4.00ml，放入50ml容量瓶中，用0.01mol/L的NaOH溶液定容，摇匀得标准苯甲酸溶液S（此溶液1ml含8μg苯甲酸）。 测量条件 参比液： 0.01mol/L的NaOH溶液；测量波长：210、215、218、220、222、224、225、226、228、230、235、240nm。 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制苯甲酸的紫外吸收曲线。 2. 标准对比法测定样品液苯甲酸的含量 取10.00ml样品液，放入50ml容量瓶中，用0.01mol/L的NaOH溶液定容，摇匀得稀释好的样品液X。 在上述曲线中找出最大吸收波长，以此作测定波长。以0.01mol/L的NaOH溶液为参比液。在完全相同的条件下测出稀释好的样品液X的吸光度值。 3、按下式计算样品液中苯甲酸的浓度： 四、实验数据与结果 1.苯甲酸吸收曲线的绘制 2. 标准对比法测定样品液苯甲酸的含量 五、结果与讨论 结果如何？是否符合预期？ 分析失败的原因：仪器因素？溶液因素？人为因素？环境因素？ 紫外分光光度计的使用方法 1.打开电源，预热20分钟 2.按MODE键设为吸光度方式 显示器显示“---nm,----Abs” 3.设定波长,如220nm 显示器显示“220nm,----Abs” 4.打开样品室盖，将参比液比色皿和待测液比色皿放入样品室盖上样品室盖 5.将参比液比色皿拉入光路中，按100%T键调零 调零完成时显示器显示“220nm,0.000Abs” 6.将待测溶液拉入光路中，直接读数 注意：每改变波长，必须重新调零 注意倒溶液时远离仪器，避免溅湿仪器 比色皿使用注意事项 1、拿取比色皿时，只能用手指接触毛玻璃面，避免接触光学面，注意保护，防止摔破。2、盛装溶液时，高度为比色皿的2/3处即可，光学面如有残液可先用滤纸轻轻吸附，然后再用擦镜纸擦拭。 3、 不可随时调换参比用的比色皿和承载样品比色皿，也就是说参比比色皿应该固定。 4、使用比色皿时, 还应特别注意通光方向。一般比色皿的毛玻璃面上都刻有箭头, 或在透光面上蚀刻有标记, 以供使用者辨认通光方向。5、不能把装有溶液的比色皿放在仪器上以防止溅湿仪器。 6、比色皿在使用后，应立即用水冲洗干净，收好。 实验课要求 穿白大褂，带笔记本记录数据 严肃认真操作实验，严禁大声喧哗 实验前后把仪器清洗干净并放回原位置 试剂瓶用完后放回原位置；讲台上的试剂瓶不能拿走；注意避免滴管和瓶盖的交叉污染 桌面保持整洁，小心避免损坏仪器 每次做完实验签名，值日生打扫干净，经老师检查通过后才能离开 实验报告下次课前交 实验报告的格式 一、实验目的 二、实验原理 三、实验步骤 四、实验数据与处理 五、结果与讨论 作图统一用Excel格式并打印粘帖 * * A λ(nm) 210 215 218 220 222 224 225 226 228 230 235 240 As Ax Cs Cx