现代仪器分析实验报告..doc

实验一 双波长分光光度法测定混合样品溶液中 苯甲酸钠的含量 一、目的 1．熟悉双波长分光光度法测定二元混合物中待测组分含量的原理和方法。 2．掌握选择测定波长（λ1）和参比波长（λ2）的方法。 二、原理 混合样品溶液由苯酚和苯甲酸钠组成，在0.04mol/LHCl溶液中测得其吸收光谱，苯甲酸钠的吸收峰在229nm处，苯酚的吸收峰在210nm处。若测定苯甲酸钠，从光谱上可知干扰组分（苯酚）在229和251nm处的吸光度相等，则 ΔA＝KC苯甲酸钠 ΔA仅与苯甲酸钠浓度成正比，而与苯酚浓度无关，从而测得苯甲酸钠的浓度。 三、仪器与试剂紫外分光光度计 苯酚 苯甲酸钠 蒸馏水 盐酸 四、操作步骤及主要结果 1．样品的制备 （1）标准储备液的配制 精密称取苯甲酸钠0.1g和苯酚0.1115g，分别用蒸馏水溶解，定量转移至500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为200μg/ml的储备液，置于冰箱中保存。 （2）标准溶液的配制 分别吸取标准苯酚储备液5.00ml和标准苯甲酸钠储备液5.00ml至100ml容量瓶中，用0.04mol/LHCl溶液稀释至刻度，摇匀，即得浓度为10μg/ml的标准溶液。 2．样品的测定 （1）波长组合的选择 于可见－紫外分光光度计上分别测定苯酚和苯甲酸钠标准溶液的吸收光谱（200~320nm），确定双波长法测定苯甲酸钠含量时的参比波长（λsnm）和测定波长（λmnm）。（2）苯甲酸钠工作曲线的绘制 配制浓度l苯甲酸钠/0.04MHCl溶液。以0.04mol/L HCl溶液为参比溶液，测定系列浓度的苯甲酸钠/0.04M HCl溶液在λm和λs处的吸光度差值，计算其回归方程YX+0.0311(R2=0.999)。（）测定 以0.04mol/L HCl溶液为参比溶液，测定混和溶液的吸光度值( n=3 )，根，RSD%）。 表1 双波长法测定不同浓度下苯甲酸钠标准溶液的吸光度 RSD均小于0.1%将Y=0.500代入回归方程YX+0.0311得X=7.2，则样品浓度为：7.2936ug/ml则其含量为：7.3*100/1000=0.73mg 五 讨论：本试验采用双波长法测定苯酚和苯甲酸钠的混合液中苯甲酸钠的含量，关键是两个波长的选择，同时应使两波长下苯甲酸钠的吸光度值足够大，以减小测量误差。 =0 。 ②待测组分在这两个波长处的吸光度差值应足够大。 实验二 导数光谱法测定混合样品溶液中苯酚的含量 一、目的 1．学习导数吸收光谱的绘制。 2．利用导数光谱法直接测定二元混合物中组分的含量。 仪器与试剂紫外分光光度计 苯酚 苯甲酸钠 蒸馏水 盐酸 三、操作步骤及主要结果 1．样品的制备 （1）标准储备液的配制 精密称取苯甲酸钠0.1g和苯酚0.1115g，分别用蒸馏水溶解，定量转移至500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，即得浓度为200μg/ml的储备液，置于冰箱中保存。 （2）标准溶液的配制 分别吸取标准苯酚储备液5.00ml和标准苯甲酸钠储备液5.00ml至100ml容量瓶中，用0.04mol/LHCl溶液稀释至刻度，摇匀，即得浓度为10μg/ml的标准溶液。 测定波长的选择：分别测定苯甲酸钠和苯酚的一阶导数吸收光谱，选择苯甲酸钠一阶导数等于0、而苯酚的一阶导数偏离零点较大的波长处，作为苯酚的测定波长269nm； 苯酚二阶导数工作曲线绘制 配制浓度为2、4、6、8、10、12 μg/ml苯酚/0.04MHCl溶液。以0.04mol/L HCl溶液为参比溶液，测定系列浓度的苯酚/0.04M HCl溶液二阶导数光谱，读取测定波长处不同浓度苯酚溶液的二阶导数值，计算其回归方程。Y=5014.2*X+0.021866(R2=0.999) 混合样品二阶导数吸收光谱的测定（n=3）平均值为：0.0015代入上述公式中得：样品中苯酚的浓度为 7.55*0.11156/0.1=8.4ug/ml 样品中苯酚的含量为8.4*100/1000=0.84mg 五 讨论：本试验采用双波长法测定苯酚和苯甲酸钠的混合液中苯酚的含量，关键是两个波长的选择，同时应使两波长下苯甲酸钠的导数光谱值为0，而苯酚的导数光谱值最大，故选用269nm下的二阶导数光谱以减小测量误差。 一、目的 握HPLC仪的操作方法； 二、提要 外标法可分为外标一点法、外标二点法及标准曲线法；当采用蒸发光散射检测器时，可用外标两点对数方程计算含量。在药物分析中，为了减小实验条件波动对分析结果的影响，采用随行外标法。 1．高效液相色谱仪； 2．ODS柱（4.6mm×150mm，5μm）； 3．甲醇（色谱纯）、重蒸馏