白藜芦醇对MCF-7细胞的促凋亡作用研究605..doc

白藜芦醇对MCF-7细胞的促凋亡作用研究 解东洋 （生物与化学工程学院12级12生物技术） 指导教师： 薛宏宇 摘要 目的：探讨白藜芦醇（RES）对人乳腺癌MCF-7细胞活性的作用和细胞凋亡的影响。方法：通过对人乳腺癌MCF-7细胞的培养，对药物白藜芦醇溶液进行不同浓度梯度的设置，进而对细胞进行诱导，用Hoechst33258染料对被药物诱导后的细胞染色，经细胞固定液固定后，置于荧光倒置显微镜下，观察其细胞核碎裂形态；应用四唑蓝比色法（MTT）对细胞进行活性检测；用DNA Ladder实验观察DNA断裂的条带。结果：在白藜芦醇的干预下，细胞核染色质出现高度固缩且部分裂解成碎块。MTT检测表明白藜芦醇能明显降低人乳腺癌MCF-7细胞的活性。DNA电泳后出现寡核苷酸片段增多。结论：人乳腺癌MCF-7细胞在体外培养条件下，白藜芦醇对其细胞的活性和凋亡有显著地影响。 关键词 白藜芦醇；MCF-7细胞；细胞凋亡；MTT；Hoechst33258 ABSTRACT：To investigate the effect of resveratrol (RES) on the proliferation of human breast cancer MCF-7 cell inhibition and apoptosis. Method: through the cultivation of human breast cancer MCF-7 cells, different concentration gradient on drug resveratrol solution, and then the cells were induced by Hoechst33258, dye on drug induced cell staining, the cells were fixed, under fluorescent microscope, to observe its nuclear fragmentation patterns; application four tetrazolium colorimetric method (MTT) for activity detection in cells; bands observed by DNA Ladder DNA fracture. Results: Resveratrol intervention, nuclear chromatin pyknosis and high decomposition into pieces. MTT detection show that resveratrol can inhibit the growth of human breast cancer MCF-7 cell activity. DNA electrophoresis after oligonucleotide fragments increased. Conclusion: MCF-7 human breast cancer cells in vitro, resveratrol had significant inhibitory effect on cell proliferation. Key words： Resveratrol;MCF-7cell;Apoptosis;MTT;Hoechst33258 前言 白藜芦醇（RES）是一种多酚类化合物，具有顺式及反式两种结构，且都具有生物学活性，其化学名为芪三酚(3,4,5-三羟基-二苯乙)， 图1 白藜芦醇化学结构图 主要富含于多种天然植物如葡萄、虎杖等中，且在新鲜的葡萄皮内含量较为丰富。白藜芦醇有广泛的生物学功能，在生物有机体中具有抗癌、抗炎症、保护心血管系统、清除自由基和抑制血小板凝集等作用。在1993年Jayafilake等的研究结果表明反式和顺式的白藜芦醇都具有抗癌活性，指出其抗癌的分子生物学机制是它们可以通过抑制蛋白质-酪氨酸激酶的活性而促使细胞凋亡。随后Jang等的研究课题小组进一步得出结论，白藜芦醇在起始、增进和发展的3个癌症发生阶段过程中，都具有较为强烈的预防细胞癌变能力，并且对癌症发生的3个阶段都有抑制乃至逆转作用。抑制癌细胞增殖，诱导癌细胞分化，诱导癌细胞凋亡[1-2]。在1997年1月，美国芝加哥Illinois University药学院的教授John Pezzuto带领的研究小组在著名的美国《Science》杂志上，发表了其多年的研究成果《葡萄的天然产物白藜芦醇的抗癌活性》，这一论文的结果对医学科学界造成了重大的轰动。论文通过大量实验证明了白藜芦醇可以有效地抑制细胞癌变相关过程的细胞活动[3-5]