生物化技术原理和实验方法要点小结（期末考试）..docx

生化技术和原理一、名词解释全血：指抗凝的血液，即在取出血液后必须立即与适量的抗凝剂充分混合，以免血液凝固血清：不加抗凝剂的血液在室温下自行凝固，所析出的淡黄色液体即为血清溶血：红细胞破裂，血红蛋白逸出相对离心力（RCF）：离心力F大小相当于地球引力（g）的多少倍沉降速度：颗粒等速沉降时的运动速度沉降系数：颗粒在离心力作用下从静止状态到达等速运动所经过的时间，简称S，量纲为秒。1S单位等于1×10--13s差速离心机：是指逐渐增加速度或低速离心与高速离心交替进行，用大小不同的离心力使具有不同沉降系数的分子分批分离的方法。它适用于沉降系数差别较大的混合样品的分离密度梯度离心：是一种带状分离法，其特点是离心管中液相介质的密度是均一的，自上而下密度逐渐增大，形成一定的梯度层析法：它是利用混合物中各组分理化性质（分子形状和大小、带电状态、溶解度、吸附能力、分配系数、分子极性以及分子的亲和力等）的差别，使各组分以不同程度分布在两相中，其中一相为固定的（固定相），另一相则流过此固定相（流动相），造成流动相对固定相做单向相对运动，流动相推动样品中各组分经固定相向前迁移，使各组分迁移速度不同，而对物质进行分离的方法分配系数和迁移率：分配系数是指一组分在固定相与流动相中的比值，常用K表示。迁移率是指一组分在相同时间内在固定向移动的距离与流动相移动距离之比值，常用Rf+表示。K值大表示该组分与固定相结合力大，迁移率小，反之，则结合力小，迁移率大离子交换剂：凡能够进行离子交换的物质。具有酸性或碱性的集团，能分别与水溶液中的阳离子或阴离子进行交换配基：通常将一对可逆结合的生物分子中能与载体相偶联上的一方称为配基薄层层析：是将吸附剂在玻璃板上均匀的铺成薄层，把待分离的混合物加到薄层板上，然后选择合适的溶剂进行展开，而达到分离、鉴定的目的的方法电泳：是指带点颗粒在电场作用下，向与其自身所带电荷电性相反的电极移动的现象迁移率：是指带点颗粒在单位电场强度下泳动的速度交连度：凝胶溶液中交联剂占单体和交联剂总量的百分数，常用C（%）表示凝胶浓度：每100ml凝胶溶液中含有单体和交联剂的总克数，常用T（%）表示比尔-郎伯定律：当一束单色光通过溶液时，光波被吸收一部分，吸收多少与溶液中溶质的浓度及溶液厚度成正比，这就是比尔-郎伯定律摩尔吸光系数：是物质对光吸收的特征值，不同物质的值不同ε值不同盐析法：是根据不同的蛋白质或酶在一定的盐溶液中溶解度不同，加入中性盐使蛋白质沉淀析出，而达到彼此分离的方法透析法：是利用小分子物质在溶液中可通过半透膜，大分子物质不能通过半透膜，而达到分离的方法酶单位：1个酶活力单位（酶单位）是在25℃、最适pH、饱和底物浓度的反应条件下，1min内，底物的减少量或产物的生成量为1微摩尔（μmol）时所需酶量，定义为一个国际单位，即1U=1μmol/minKat单位：在25℃、最适pH、饱和底物浓度的反应条件下，1s钟内转化1mol底物所需要的酶量，即1Kat=1mol/s酶的比活力：是指每毫克蛋白质中所含有的酶活力单位数，即U/mg蛋白质或Kat/kg蛋白质同位素：原子序数相同，而质量分数不同的元素互称为同位素核衰变（放射性衰变）：不稳定同位素的原子核自发衰变后转变成另一种稳定的同位素半衰期：一定数量放射性同位素原子数目减少至其初始值一半时所需的时间放射性活度：放射性同位素在单位时间内发生衰变的原子数目或核衰变的次数局里（Ci）：是放射性活度的单位，表示1s钟内发生3.7×1010次核衰变贝柯勒尔（Bq）在国际单位制（SI）中规定，1s钟内发生1次核衰变规定为1Bq闪烁体：是一类吸收高能粒子或射线后能够发光的材料，在辐射探测领域发挥着十分重要的作用。通常在应用中将其加工成晶体，称为闪烁晶体内照射：放射性物质进入人体对机体发生照射外照射：来自人体外的辐射源对人体的照射二、填空微生物破碎细胞的方法：研磨法：超声波振荡法、酶解法动物血液采集过程中应注意5个问题：规定动物采血时间、血液样品来源应一致、防止分解、防止污染、防止溶血血液样品的治本有4类：全血、血浆、血清、无蛋白血滤液的制备离心机按转速可分为：普通（6000r/min）、高速（6000~25000r/min）、超速（25000r/min）；按使用温度可分为：常温、冷冻；按用途可分为：制备型、分析型层析技术依据操作方式可分为：纸层析、柱层析、薄层层析；按流动相可分为：液固层析、液液层析、气固层析、气液层析；按分离原理可分为：吸附层析、离子交换层析、分配层析、凝胶层析、亲和层析高效液相色谱与经典液相色谱法区别：高速、高效、高灵敏度电泳按分离原理分为4类：区带电泳、移界电泳、等速电泳、等电聚焦不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的3种物理效应：电荷效应、分子筛效应、浓缩效应琼脂糖凝胶电泳主要用于分离