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蜂胶总黄酮对衰老小鼠学习记忆的影响
蜂胶总黄酮对衰老小鼠学习记忆的影响
导读:就爱阅读网友为您分享以下“蜂胶总黄酮对衰老小鼠学习记忆的影响”资讯,希望对您有所帮助,感谢您对92的支持!
作者:王浩 张庆乐 徐晓燕 王晓丹 高永峰 高允生
【摘要】 目的 观察蜂胶总黄酮对d半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆的影响,并对其作用机制进行了探讨。方法 小鼠颈背部皮下注射d半乳糖42 d,制备衰老模型。通过小鼠学习记忆能力、脑组织中超氧化物歧化酶(sod)、谷胱甘肽过氧化物酶(gshpx)、丙二醛(mda)、脂褐素(lf)水平的测定,评价蜂胶总黄酮的抗衰老作用。结果 与空白对照组相比,d半乳糖(150 g/kg,sc,42 d)使小鼠学习记忆能力降低,脑组织中sod、gshpx活性下降,mda、lf含量增加,而蜂胶总黄酮30 mg/kg、60 mg/kg和90 mg/kg三个剂量组对上述病理变化具有不同程度改善作用。结论 蜂胶总黄酮能改善d半乳糖诱导衰老小鼠学习记忆功能障碍,其机制可能是抗氧化调节自由基代谢。
【关键词】 蜂胶;黄酮;学习记忆;脂褐素;衰老
蜂胶是蜜蜂从植物芽孢或树干采集的蜂蜜,混入蜜蜂上颌腺分泌物和蜂蜡后加工制成的芳香味的胶状固体物质。蜂胶富含多种具有药用价值的活性成分,其中主要是黄酮类化合物,研究发现蜂胶黄酮具有抗菌、抗病毒、抗炎症、抗肿瘤、免疫调节、清除自由基等生物学活性〔1,2〕 。 而蜂胶黄酮对学习记忆的影响少见报道。本课题组前期研究发现蜂胶醇提物对各种学习记忆障碍模型小鼠具有明显保护作用〔3〕 。本文在此基础上,采用超声法提取蜂胶总黄酮,观察了其对d半乳糖诱导衰老模型小鼠学习记忆功能的影响,并从抗氧化角度对其作用机制进行了初步探讨,以期为蜂胶的抗衰老作用提供实验依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 蜂胶原胶 由山东省实验种蜂厂提供。参照 文献 〔4〕,超生法提取蜂胶总黄酮,临用前0.15%吐温80溶解,配成所需浓度备用。参照文献〔5〕,以芦丁为标准品,用比色法测定总黄酮含量。
1.1.2 昆明种小鼠 体重18~22 g,由泰山医学院实验动物中心提供,合格证号:鲁动质字020103。
1.1.3 材料及仪器 d半乳糖,amresco生产,上海贝基生物技术有限公司分装,临用前用生理盐水配制合适浓度; 超氧化物歧化酶(sod)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(gshpx)试剂盒、 丙二醛(mda)试剂盒、脂褐素(lf)试剂盒、考马斯亮蓝测定试剂盒,购自南京建成生物工程研究所;芦丁标准品,购自 中国 药品生物制品检定所。kq600db型数控超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司生产;y型迷宫刺激器,安徽省淮北正华生物仪器设备有限公司生产;紫外分光光度计,上海棱光技术有限公司生产;rf5301pc荧光分光光度计,日本岛津生产。
1.2 方法
1.2.2 y型迷宫试验〔7〕 采用y型迷宫法,迷宫共分为三个互通的臂。实验测试时,以a为起步区,b为安全区,c为危险区。工作电压20~30 v。小鼠在起步区受到电击后,一次性跑入安全区为正确,否则为错误,即为一次训练。下一次训练以b为起步区,c为安全区,a为危险区,依次往复。共训练33次,其中前3次作为小鼠适应环境不进入统计,记录后30次的错误次数,为学习成绩。24 h后,用同样的方法测试,为记忆成绩。
1.2.3 脑组织生化指标的测定 测试后的小鼠快速断头处死,随机每组选取8只,取其脑组织制成10%水相脑匀浆,测定脂褐素含量;另外8只取其脑组织用生理盐水制成10%匀浆,3 000 r/min低温离心10 min,取上清液测定sod、gshpx活性及mda含量。考马斯亮蓝作蛋白定量。
1.3 统计学处理 数据用x±s表示,使用spss14.0软件进行统计分析,组间显著性检验采用单因素方差分析。
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