分子生物学11技术复习题分子生物学11技术复习题.doc

分子生物学复习题（生物技术2011级） 名词解释 核小体 DNA的半保留复制 冈崎片段 复制子 转座子 反意义链 有意义链 转录因子 反式作用因子 顺式作用因子 hnRNA 断裂基因 外显子 内含子 核酶 多顺反子 单顺反子 密码子 反密码子 SD序列 信号肽 基因表达 可诱导基因 可阻遏基因 增强子 沉默子 克隆载体 表达载体 感受态细胞 基因组DNA文库 简述题 什么是常染色质？什么是异染色质？ 大肠杆菌转录终止的2种机理 真核生物mRNA转录后的加工。 遗传密码的特点？ 蛋白质前体进行怎样的加工？ 重组DNA技术的基本步骤？ 载体应具备的条件？ 介绍两种细菌转化方法 介绍PCR基本原理 基因组DNA文库构建基本流程 增强子作用特点？ 简述三种RNA在蛋白质生物合成中的作用 基因工程常用的工具酶都有哪些？各有哪些用途？ 试比较转录与复制的区别。 论述 大肠杆菌蛋白质生物合成过程。 介绍大肠杆菌色氨酸操纵子的调节作用。 乳糖操纵子的调控原理？ 真核基因表达调控特点？ 参与DNA复制的酶有那些？各有何功能？ 乳糖操纵子的调控原理 乳糖操纵子由三个结构基因Z、Y、A,分别编码(-半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰化酶。其调控区由启动子、操纵原件和CAP结合位点共同构成。乳糖操纵子的转录起始是由CAP和阻遏蛋白两种调控因子来控制的，CAP起正调控作用。当葡萄糖和乳糖的存在与否而有4种不同的组合：⑴都存在时，乳糖的存在解除了阻遏蛋白对转录的抑制作用。但葡萄糖使细胞内cAMP水平降低，cAMP-CAP复合物不能形成，CAP不能结合到位点上，转录不能启动，基因处于关闭状态；⑵仅葡萄糖存在时，无诱导剂（半乳糖）存在，阻遏蛋白与DNA结合。葡萄糖的存在，cCAMP浓度低，CAP仍不能发挥正调控作用，基因处于关闭状态；⑶都不存在时，无葡萄糖，CAP可发挥正调控作用，但无诱导剂，阻遏蛋白的负调控作用使基因仍处于关闭状态；⑷仅乳糖存在时，CAP发挥作用，存在诱导剂，基因被打开，启动转录。 真核基因表达调控的特点 ㈠RNA聚合酶活性受转录因子调控： 真核生物中存在RNA polⅠ、Ⅱ、Ⅲ三种不同的RNA聚合酶，分别负责转录不同的RNA。这些RNA聚合酶与相应的转录因子形成复合体，从而激活或抑制该酶的催化活性。㈡染色质结构改变参与基因表达的调控：真核生物DNA与组蛋白结合并形成核小体的结构，再进一步形成染色质。当真核基因被激活时，染色质的结构也随之发生改变。㈢正性调节占主导：真核基因一般都处于阻遏状态，RNA聚合酶对启动子的亲和力很低。通过利用各种转录因子正性激活RNA聚合酶是真核基因调控的主要机制。㈣转录后加工修饰过程复杂：特别是mRNA，转录后仅形成其初级转录产物——HnRNA，然后再经剪接、加帽、加尾等加工修饰，才能转变为成熟的mRNA。 参与DNA复制的酶有那些？各有何功能？ ⑴解链酶(helicase)：解链酶的作用就是打开DNA双链之间的氢键。⑵引物酶(primase) 它是一种特殊的RNA聚合酶，可催化短片段RNA的合成。⑶DNA聚合酶Ⅰ的5′→3′聚合活性, 3′→5′外切核酸酶活性, 5′→3′外切核酸酶活性,DNA polⅠ并不是DNA复制过程中的主要酶，它的作用主要与DNA损伤后的修复有关。⑷DNA聚合酶Ⅱ,它具有5′→3′聚合活性和3′→5′外切活性，而没有5′→3′外切活性，它的作用可能与DNA损伤修复有关。⑸DNA聚合酶Ⅲ, 是在DNA复制过程中起主要作用的聚合酶。⑹拓扑异构酶(topoisomerase)是一类改变DNA拓扑性质的酶。拓扑异构酶Ⅰ(TopoⅠ)的主要作用在体外可催化DNA的各种拓扑异构化反应，而在生物体内它们可能参与了DNA的复制与转录。⑺连接酶(ligase)的作用是催化相邻的DNA片段以3′、5′－磷酸二酯键相连接。 选择题（单选或多选） 1．证明 DNA 是遗传物质的两个关键性实验是：肺炎球菌在老鼠体内的毒性和 T2 噬菌体感染大肠杆菌。这两个实验中主要的论点证据是（ C ）。 A．从被感染的生物体内重新分离得到 DNA 作为疾病的致病剂 B．DNA 突变导致毒性丧失 C．生物体吸收的外源 DNA（而并非蛋白质）改变了其遗传潜能 D．DNA 是不能在生物体间转移的，因此它一定是一种非常保守的分子。 2．1953 年 Watson 和 Crick 提出（ A ）。 A．多核苷酸 DNA 链通过氢键连接成一个双螺旋 B．DNA 的复制是半保留的，常常形成亲本子代双螺旋杂合链 C．三个连续的核苷酸代表一个遗传密码 D．遗传物质通常是 DNA 而非 RNA 3．分裂间期的早期，DNA 处于（ A ）状态。 A．单体连续的