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组培考试复习重点.
一、名词解释
1、植物组织培养:植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养,并在人工控制的环境条件下,使其发育成完整植株的科学技术?
2、胚胎培养:指对植物的胚、胚胎、胚珠和子房的培养。
3、愈伤组织:原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。在组培中,则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
4、植物细胞的全能性:指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力。
5、人工种子:指通过组织培养技术,将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚,然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中,组成便于播种的类似种子的单位。
6、细胞分化:一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。?
7、原生质体培养:脱去全部细胞壁的细胞叫原生质体,对离体植物的原生质体进行培养,形成完整植株的培养技术。
8、植物分生组织培养:是指对植物的分生组织进行离体培养的技术,包括植物根尖、茎尖等顶端分生组织和形成层组织的培养。其中茎尖培养广泛应用于植物再生和脱病毒研究。
9、初代培养:是指在组培过程中,最初建立的外植体无菌培养阶段。即无菌接种完成后,送入培养室的外植体在适宜的光、温、气等条件下被诱导成无菌短枝(或称茎梢)、不定芽(丛生芽)、胚状体或原球茎等中间繁殖体的过程。(将外植体进行第一次培养。)
10、植物细胞培养:是指对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞(或小细胞团)进行离体培养,形成单细胞无性系或再生植株的技术。
11、外植体:植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。(如器官、组织、细胞、原生质体、种子等)
12、脱分化:一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象。
13、再分化:愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
二、简答题
1、简述茎尖作为外植体进行初代培养的培养基配方和培养环境特点?
答:
简述无菌操作的具体步骤?
答:(1)?在接种4h前用甲醛熏蒸接种室;?
?在接种前15-20min,打开超净工作台的风机以及台上的紫外灯;?
(3)?接种员先洗净双手,在缓冲间换好专用实验服,并换穿拖鞋等;?
(4)?上工作台后,用酒精棉球擦拭双手,特别是指甲处。然后70%酒精喷雾降尘,并擦拭工作台面;?
(5)?接种工具蘸95%酒精,灼烧;?
(6)?接种时将瓶口斜着,使瓶口在酒精灯火焰上转动,灼烧数秒钟。接完种后,将瓶口在火焰上再灼烧数秒钟。?
(7)?接种时,接种员双手不能离开工作台,不能说话、走动和咳嗽等;?
(8)?接种完毕后要清理干净并用酒精擦工作台。
实验前20min将超净工作台的紫外灯打开,进行灭菌。试验时关闭紫外灯,避免人员被紫外线照射。
用酒精喷壶或酒精棉将超净工作台消毒,然后实验操作者的手和小臂也用70%酒精消毒。实验器具用酒精喷壶消毒之后,放入装有95%酒精的广口瓶中。
点燃超净工作台上的酒精灯,将广口瓶中的镊子和剪刀等器械取出,在酒精灯上灼烧,放置在灭菌支架上冷却后使用;镊子和剪刀等器械也可以用灭菌器灭菌,由于灭菌器温度为300℃,故器械在灭菌器中灭菌1-2min,然后放在灭菌支架上冷却后使用。
需要接转的培养瓶或新培养瓶均应在酒精灯下方处打开瓶盖,且培养瓶的瓶口须在酒精灯上灼烧,然后用冷却的无菌器械将材料切割后,植入新培养基上,快速将瓶盖等封口材料在酒精灯上燎烧,盖上瓶盖等封口材料。记录材料类型和接种日期,放置培养架上
2、简述茎尖作为外植体进行初代培养的培养基配方和培养环境特点?
3、简述胚胎培养的应用领域?
答:1)在远缘杂交育种中的应用:克服杂种胚不能正常发育?
克服珠心胚的干扰,提高育种效率?
3)缩短育种周期?
4)测定休眠种子的萌发率?
5)理论研究中的应用
克服远缘杂交不亲和性
远缘杂交中由于胚乳发育不正常或杂种胚与胚乳之间生理上的不协调,造成杂种胚早期夭折。将早期幼胚进行离体培养进行胚挽救,可克服这种受精后障碍,产生远缘杂种。,
打破种子休眠。缩短育种周期
许多植物的种子发育不完全或有抑制物存在而影响种胚发芽。通过幼胚培养,可促使这些植物的幼胚达到生理和形态上的成熟而提早萌发形成植株。
提高种子萌发率
长期营养繁殖的植物,虽具有形成种子的能力,但其生活力较低,萌发成苗率低下,胚培养可促进这类种子萌发和形成幼苗。
意义:①、克服远缘杂种的不育性?
②、使胚胎发育不完全的植株获得后代?③、缩短育种年限,提高育种效率
4、简述生长素的种类及其在组培中的主要生理作用?
答:生长素类?
①IAA(吲哚乙酸):是天然存在的生长素,亦可人工合成,其活力较低,是生长素中活力最弱的激素,对器官形成的副作用小,高温高压易被破坏,也易被细胞中的IAA分解酶降解,受光也易分解。?
②NAA(萘乙酸):
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