高考生物第十单元第36讲讲述.docx

第36讲　微生物的利用[考纲要求]　1.大肠杆菌的培养和分离。2.分离以尿素为氮源的微生物。考点一　大肠杆菌的培养和分离1．大肠杆菌(1)特性：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。(2)细菌的繁殖：以分裂的方式繁殖，分裂速度很快。2．细菌的扩大培养扩大培养用LB液体培养基，划线分离用LB固体平面培养基。3．分离培养基灭菌↓倒平板↓接种↓划线分离↓培养观察50mLLB液体培养基和50mLLB固体培养基及培养皿高压蒸汽灭菌将培养基分别倒入4个灭菌后的培养皿中，水平放置，使之形成平面在装有液体培养基的三角瓶中接种大肠杆菌，培养12h用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固体培养基的平板上连续划线，盖好培养皿培养皿倒置(盖在下面)，放在37℃恒温培养箱中培养12～24h后，可看到划线的末端出现不连续的单个菌落4.消毒和灭菌比较比较项目理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能5.微生物接种的两种常用方法比较比较划线分离法涂布分离法工具接种环玻璃刮刀原理通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细菌细胞繁殖而来的肉眼可见的细胞群体，即菌落将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细菌细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落特点方法简单，但不适宜计数单菌落更易分开，但操作复杂些目的使培养基上形成单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体——菌落[思维诊断](1)培养基分装到培养皿后进行灭菌(2013·江苏，18A)(　×　)(2)从有机废水中分离分解有机物的微生物时，接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养(2013·江苏，18C)(　×　)(3)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(2013·重庆，5A)(　√　)(4)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌(　×　)题组　大肠杆菌的分离和培养1．检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1)要测定饮用水中大肠杆菌的数量，常采用________法，通常将水样进行一系列的梯度____________，然后将上述的水样用涂布器分别涂布到______________的表面进行培养，记录菌落数量。用该方法统计样本菌落数时________(填“是”或“否”)需要对照组。原因：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)下面所示的四种菌落分布图中，不可能由上述方法得到的是________。(3)大肠杆菌的培养条件是无菌，培养基配制时需加入氯化钠，以维持__________。配制培养基时先__________________(填“调节pH”或“灭菌”)后________(填“调节pH”或“灭菌”)。答案　(1)涂布分离　稀释　LB固体培养基　是　因为需要判断培养基使用之前是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)　(2)D　(3)渗透压　调节pH　灭菌2．请回答下列有关细菌的培养与分离问题。(1)环卫部门要检测某地饮用水的大肠杆菌超标问题，通常采用__________法。用此法分离时，需要将待测水样稀释若干倍，再取______mL稀释度不同的待测样品加在固体培养基上，用__________涂布在培养基平面上，盖好培养皿并将培养皿倒置，在37℃恒温培养箱中培养12～24h，可以得到相互分开的菌落。计数时为了减小误差，每个浓度的待测样品________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)如图4支试管分别代表4种微生物在半固体培养基(琼脂含量3.5g/L)中的生长状态，最可能是大肠杆菌生长状态的是________。(3)从土壤中分离出有脲酶的细菌时，在配制好尿素固体培养基后，加入尿素溶液往往要通过______________过滤，使之无菌。由于脲酶能水解尿素，会使培养基中的酚红指示剂变为______________，从而在其菌落周围出现________。答案　(1)涂布分离