他人研究..docVIP

1?? 高效液相色谱法测定[ 1] 色谱条件: 色谱柱: 十八烷基硅烷键合硅胶柱。流动相: 2 000 m l容量瓶中, 加入1 400 m l水, 400 m l乙腈, 2 m l三乙胺, 平衡至室温, 用氢氧化钠溶液( 0. 2 mo l/L)或稀冰醋酸溶液调节pH 为5. 9+-0. 1, 再用水稀释至刻度。检测波长: 254nm, 流速: 1. 0 m l/m in, 进样量: 20μ l。对照品贮备液和供试品溶液的制备: 精密称取甲氧苄啶对照品40 mg, 磺胺甲噁唑对照品200 mg, 置50 m l容量瓶中,加甲醇稀释至刻度, 摇匀, 得浓度约为0. 8 m g /m l的甲氧苄啶和浓度约为4 m g /m l的磺胺甲噁唑的对照品贮备液, 用时稀释。取样品20片, 研细, 精密称定适量(约相当于磺胺甲噁唑160 mg ), 置100 m l容量瓶中, 加甲醇适量, 充分溶解, 再加甲醇至刻度, 摇匀, 过滤, 精密量取续滤液5 m l 至50 m l容量瓶中, 用流动相稀释至刻度, 作为供试品溶液。标准曲线的绘 制: 精密量取对照品贮备液0. 3、0. 5、0. 8、1. 0、1. 2 m l 分别置10 m l容量瓶中, 加流动相稀释至刻度, 摇匀, 分别进样20 μl结果表明, 磺胺甲噁唑对照品溶液浓度在0. 12~ 0. 48 mg /m l范围内与峰面积呈线性关系( r= 0. 9993), 甲氧苄啶对照品溶液浓度在0. 024~ 0. 096 mg /m l范围内与峰面积呈线性关系( r= 0. 9995)。 结论: 此法专属性强, 操作简便, 灵敏度高,重现性好, 能有效控制产品质量。中国药典[ 2] 中规定检测波长为240 nm; 美国药典[ 3] 同样规定复方磺胺甲噁唑的含量测定方法为高效液相色谱法。 2 双波长薄层扫描法测定[ 4] 实验条件: 以硅胶GF254 铺板, 薄层厚度0. 3 mm, 自然干燥后于110℃活化1 h。以氯仿-甲醇-二甲基甲酰胺( 20：2：1) 为展开剂, 饱和20 m in 上行展开, 展距10 cm, 取出晾干, 喷以8%茚三酮乙醇液, 于70℃加热10 m in。SMZ测定波长257 nm , 参比波长304 nm; TMP测定波长239 nm, 参比波长295 nm。线性化因子SX= 3, 扫描步间距Y= 0. 04, 最小宽度8 mm, 最小面积100。锯齿法扫描。对照品溶液和供试品溶液的制备: 精密称取105℃ 干燥至恒重的SMZ对照品50mg和TMP对照品10mg,分置50ml容量瓶中,各加适量乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀, 作为对照品溶液。取本品10片精密称定, 研细。精密称取适量(约相当于SMZ50mg和TMP10mg)置50ml容量瓶中,加乙醇适量, 超声处理5min使SMZ与TMP溶解,加乙醇稀释至刻度, 摇匀, 作为供试品溶液。标准曲线的绘制: 精密吸取对照品液SMZ和TM P各1、2、3、4、5 μl 分别点于同一薄层板上,用展开剂展开,展距10cm, 取出晾干,显色扫描测定以积分面积为纵坐标Y,以点样量为横坐标X线作图, 线性回归方程为SMZ:Y=2.963×10- 5X+0.6695,r= 0.997,在4. 0~ 20μg范围呈良好的线性关系; TMP: Y= 9. 305×10-5X-0.0703, r=0.998,在2.0~10μg范围内呈良好的线性关系。 结论: 本法操作简便, 准确性高, 重现性好, 可用于生产中的快速分析。 3?? 高效毛细管电泳法测定[ 5] 实验条件: 运行缓冲液: 25mm o l/L硼砂- 硼酸液, 其中含30 mm o l/L 十二烷基磺酸钠( pH 9. 2)及10%乙腈; 运行电压: 20 kV; 检测波长: 214 nm; 压力进样: 3. 5 kPa ?? 5 s; 每次开机以0. 1 mo l/L氢氧化钠溶液冲洗2 m in, 再用水冲洗2 m in, 最后运行缓冲液冲洗5 m in, 2次进样之间运行缓冲液冲洗2 m in。对照品溶液、内标溶液和供试品溶液的制备: 精密称取甲氧苄啶对照品和磺胺甲噁唑对照品适量, 加甲醇溶解并稀释成浓度约为0. 1 mg /m l的甲氧苄啶和浓度约为0. 5 m g /m l的磺胺甲噁唑的对照品溶液。另取肉桂酸适量, 加甲醇溶解并稀释成浓度约为0. 5 m g /m l的内标物溶液。取本品20片, 研细, 精密称取适量(约相当于SMZ 0. 1 g和TM P0. 02 g)置100 m l容量瓶中, 加甲醇50 m ,l超声处理5 m in使SM Z与TMP溶解, 加甲醇至刻度, 摇匀, 过滤, 精密量取续滤液1 m ,l 精密加入内标液1 m