溴水氧化亞甲蓝荧光法测定头孢氨苄与头孢拉定.docVIP

溴水氧化亚甲蓝荧光法测定刘 奇1*，杨红瑞，王爱军 （河南师范大学 化学与环境科学学院，河南 新乡 453007） 摘要：与Br2发生反应，剩余的Br2能氧化亚甲蓝（MB）使其荧光降低，通过测定亚甲蓝的荧光间接测定的含量，β-环糊精（β-CD）荧光，了测定的新方法。，线性范围为0.00～ mg/L、0.0008～ mg/L，检出限为0.000 mg/L、0.0006 mg/L。本方法操作方便, 稳定性好, 灵敏度高,可作为痕量的检出分析方法。 关键词：β-环糊精；亚甲基蓝；；；溴酸钾溴化钾；荧光方法 (cephalexin, CPX)和头孢拉定(cephradine, CPD)同属于第一代头孢菌素类抗生素,与同类药物相比对革兰氏阳性细菌具有更强的抗菌作用,且价格较低廉,故使用更为广泛。对此类头孢菌素的测定已见报道的方法有分光光度法[ 1-3 ]、荧光法[4-7]、流动注射化学发光法[ 8-9]、高效液相色谱法[10]、电化学分析法[11]等。但分光光度法的灵敏度不够，高效液相色谱法所需设备较昂贵,难于普及，而已报道的荧光法以及化学发光法均需对此类药物先在强酸介质或强碱介质中水浴加热水解20 min使其生成荧光产物，分析过程较长且步骤繁琐。 本文基于Br2既能氧化，与亚甲基蓝（MB）发生氧化反应，使MB荧光降低β-环糊精β-环糊精与MB形成包合物使MB荧光强度增至原来的2倍，了一种测定的新方法。[4-7]相比较，本法具有更高的灵敏度检测限，已直接应用于胶囊中CPXCPD含量的测定，结果令人满意。 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 FP-6500型荧光光谱仪﹙日本JASCO公司﹚；UV-1700紫外可见分光光度计﹙SHIMADZU﹚；BS-110S 型电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）。 β-环糊精（国药集团化学试剂有限公司，使用前经沸水重合晶两次，化学纯）：1.0×10-2 mol/L；亚甲基蓝（上海试剂三厂）：1.0×10-4 mol/L； 盐酸: 5 mol/L；KBrO3（上海试剂二厂）-KBr（北京化工厂）标准储备液[12]：250 mg/L（准确称取0.0250 g KBrO3，0.2500 g KBr与100 mL容量瓶中，并用二次蒸馏水稀释至刻度），每次使用前稀释成25 mg/L的工作液；标准品（CPX，）储备液：100 mg/L（保存在棕色瓶中），每次使用前稀释成10 mg/L的工作液；标准品（CPD，）储备液：100 mg/L（保存在棕色瓶中），每次使用前稀释成10 mg/L的工作液；其它试剂均为分析纯；实验用水为二次去离子水。 1.2 实验方法 在10 mL比色管中依次加入10 mg/L的溶液 mL，5 mol/L 盐酸0.4 mL，25 mg/L KBrO3-KBr溶液0. mL摇匀，反应10 min；然后加入1.0×10-4 mol/L亚甲基蓝溶液1.0 mL，反应10 min后再加入3 mL的β-CD，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置30 min后，以660 nm为激发波长，测定溶液的荧光强度F，在同样的条件下扫描其紫外-可见光谱。 2 结果与讨论 2.1 荧光光谱及紫外-可见光谱 按1.2.1的实验步骤，分别绘制了在5 mol/L的HCl介质环境中，亚甲基蓝在β-CD和水溶液中的荧光光谱图和紫外-可见吸收光谱图。由图1可看出，β-CD加入后，MB的荧光强度大大提高（曲线1和1）；加入后，由于与Br2发生反应，减少了Br2对亚甲蓝的氧化，使得亚甲蓝的荧光进一步增强（曲线1a和1曲线1和1），这样可以在较低浓度下测定的含量；不管是荧光强度F还是吸光度A加入β-CD后均大大提高；这些证明β-CD可以作为增敏MB的敏化剂。 图1 荧光发射光谱Fig. 1 Emission spectra 图2 紫外-可见吸收光谱图 Fig. 2 Absorption spectra CHCl: 2×10-1 mol/L；C: 3mg/L；C: 3mg/L；C KBrO3-KBr: 1. mg/L；CMB: 1×10-5 mol/L；Cβ-CD: 3×10-3 mol/L 2.2 实验条件的优化 2.2.1反应介质及酸度确定 不同浓度的HCl荧光强度F结果： mol/LHCl溶液，HCl溶液加入量超过0.4 mL后，随着HCl浓度增大减小，本实验选择 mol/L HCl溶液加入量为0.4 mL。 2.2.2 KBrO3-KBr溶液用量选择 ～ mL体积范围内，试验了25 mg/L KBrO3-KBr溶液用量结果随着KBrO3-KBr溶液用量的增加，其F值保持不变而后随着KBrO3-KBr溶液的用量的增加而下降，如图3所示，当KBrO3-KBr溶液的用量在0.mL时，体系中的已经反应完全，当KBrO