濾纸法酶活测定过程及数据.docVIP

滤纸法酶活测定 接种，根据不同的菌种配所需的培养基，本实验中C24,M1,MM01,BJJ,MQM为PDA培养基，F8,FN6,FN7.FN10,FN11,FN12,FN*,C10为LB培养基。在无菌条件下将其接种于以灭菌的液体培养基里，每个菌种做三个重复。 培养，将其放置于相同环境摇菌培养，适宜温度为28℃左右，边培养边观察生长情况。 离心，取对数期的培养液，培养液经3500r/min离心10min，分别取上清液0.5ml加入两组试管，一组为实验组，一组为对照组，并分别加0.5ml缓冲液，将实验组预热到50℃，将对照组沸水浴灭活5min,用水冷却，再将其放入50℃水浴锅。再向实验组和对照组分别加入1×6cm新华滤纸一条50℃水浴保温1h取出，水浴灭活5min，用3mlDNS显色后稀释3倍。 测OD值，首先以水为空白对照，分别测上述实验组和对照组的OD值，再以上述灭活酶液（即对照组）为对照测其对应的实验组的OD值，记录数据，求三个重复测得的平均值，即为最终所需OD值，数据记录如下： 菌种 重复 以水为对照 以灭活酶液为对照 平均值 FN7 细菌 实验1 0.074 0.021 0.015 对照1 0.063 实验2 0.054 0.010 对照2 0.050 实验3 0.067 0.015 对照3 0.059 FN* 细菌 实验1 0.063 0.002 0.003 对照1 0.060 实验2 0.050 0.012 对照2 0.036 实验3 0.056 0.003 对照3 0.052 FN12 酵母菌 实验1 0.069 0.002 0.010 对照1 0.052 实验2 0.078 0.010 对照2 0.066 实验3 0.072 0.011 对照3 0.060 F8 细菌 实验1 0.137 0.040 0.038 对照1 0.133 实验2 0.178 0.031 对照2 0.152 实验3 0.152 0.043 对照3 0.147 FN11 细菌 实验1 0.183 0.002 0.043 对照1 0.143 实验2 0.128 0.051 对照2 0.102 实验3 0.180 0.034 对照3 0.162 FN6 酵母菌 实验1 0.241 0.018 0.044 对照1 0.147 实验2 0.441 0.036 对照2 0.276 实验3 0.340 0.052 对照3 0.198 FN10 细菌 实验1 0.421 0.221 0.013 对照1 0.143 实验2 0.177 0.008 对照2 0.130 实验3 0.198 0.017 对照3 0.121 C24 放线菌 实验1 0.447 0.203 0.169 对照1 0.220 实验2 0.368 0.162 对照2 0.271 实验3 0.372 0.143 对照3 0.253 C10 细菌 实验1 0.179 0.018 0.063 对照1 0.120 实验2 0.222 0.071 对照2 0.116 实验3 0.221 0.054 对照3 0.131 BJJ 霉菌 实验1 0.813 0.176 0.164 对照1 0.630 实验2 0.541 0.105 对照2 0.455 实验3 0.754 0.211 对照3 0.512 M1 霉菌 实验1 2.866 0.554 0533 对照1 2.404 实验2 2.913 0.774 对照2 2.505 实验3 2.851 0.511 对照3 2.501 MQM 霉菌 实验1 2.723 0.501 0.491 对照1 2.351 实验2 2.693 0.482 对照2 2.242 实验3 2.803 0.489 对照3 2.435 MM01 霉菌 实验1 2.406 0.308 0.431 对照1 2.012 实验2 2.852 0.528 对照2 2.366