化学研究方法-色谱分析幻灯片.pptVIP

利用被测样品（气-液和气-固）加热平衡后，取其挥发气体部分进入气相色谱仪分析。 分配色谱：极性、非极性的固定相，离子色谱，具有磺酸基和季铵基的离子色谱，具有不同孔径排阻色谱。 去除载气中的水、有机物等杂质（依次通过分子筛、活性炭等）； * 2006.11.30介绍到这里。 * 2006.11.30介绍到这里。 使用时需要调整空气、氢气、载气的比例关系，检测器灵敏度达到最佳。 速率方程：H：理论踏板高，u：载气流速，A：涡流扩散，B：分子扩散项，C:传质阻力项 柱温升高，分离度下降，色谱峰变窄变高。柱温↑，被测组分的挥发度↑，即被测组分在气相中的浓度↑，K↓，tR↓，低沸点组份峰易产生重叠(升得过快时)。 柱温↓，分离度↑，分析时间↑。对于难分离物质对，降低柱温虽然可在一定程度内使分离得到改善，但是不可能使之完全分离，这是由于两组分的相对保留值增大的同时，两组分的峰宽也在增加，当后者的增加速度大于前者时，两峰的交叠更为严重。 相似相溶的原理。多柱测试 些样品溶于丙酮 ( 脱水 ) 时会产生胶化现象 二元高压是两个泵同时向混合池送液（高压混合）；四元低压只有一个泵，利用比例阀、分时吸取不同的溶液（低压混合），再由这个泵送入到混合池。在做梯度洗脱的时候，由于流动相的比例一直是变化的，所以基线经常会漂移，如果再加上比例阀对流动相的分时变化，基线漂移就会更多些。因此，我认为二元高压更适合做梯度，当然四元做梯度也可以。 一些多孔球形或无定形硅胶基体，与硅烷偶联剂反应，制成非极性烷基或苯基固定相。 利用不同组分与固定相的作用的大小达到分离的目的 气相色谱常见问题 气相色谱常见问题 确定待测样是否符合GC要求 沸点低，350oC,易挥发，热稳定 浓度尽可能低：小于10ppm 待测样不能含有水份(特殊柱：水样) 溶剂沸点尽可能低，尽量不选用丙酮 实验注意事项 柱温要低于固定液使用温度 样品必须经过0.45μm或0.22μm的滤膜过滤 色谱的基本概念 气相色谱 提纲 液相色谱 测定对象拓展 检测器不同 GC与LC的比较 LC与HPLC的比较 0.05-1.0 1-20 分析时间/h 10-6-10-2 1-10 进样量/g 2×105-5×104 2-50 色谱柱柱效/(理论塔板数/m) 2-20 0.001-0.1 色谱柱入口压力/Mpa 5-50 75-600 固定相粒度：粒径/μm 3-5 10-50 色谱柱柱内径/mm 10-25 10-200 色谱柱柱长/cm HPLC LC 项目 1、农药残留量分析 ：含氯农药 、有机磷  农药 、除虫菊等2、致癌物质 ：硝基呋喃及其代谢物、霉 素 、亚硝胺、苯并芘等3、水质分析：内分泌污染物等4、其它…… 液相色谱的应用-环保方面 1、蛋白质分析2、肽类的分析3、核酸4、氨基酸 5、其它…… 液相色谱的应用-生命方面 1、新药研发：目标物的检测、纯度等2、药品的预处理：片剂，油膏，水剂等3、体液：血、尿、脊椎液、唾液等4、抗菌素 ：青霉素 、甾族(激素)等 5、其它…… 液相色谱的应用-医药方面 仪器结构 进样口 检测器 色谱图 色谱柱 溶剂 泵 混合器 高压输液泵 溶剂柜 真空脱气机 G1322A 四元泵 G1311A 装有高分子膜的真空容器。溶解气体的分子尺寸较小，与高分子膜有更强的亲和力。 只有一个泵，配有比例阀，能够在不同时间吸取不同溶剂 手动进样器 六通阀与定量环 自动进样100样品盘/机器手/自动洗针 机械手 样品盘 自动进样器 柱温箱 外挂架 色谱柱 UV/Vis双灯，全波长检测，需选择目标分析物的特征波长即可，兼顾强度与噪声水平 ＤＡＤ检测器 检测器 钨灯 耦合透镜 氘灯 光源透镜 (消色差透镜) 氧化钬滤光片 支撑透镜 Flow cell 光谱透镜 光栅 阵列 狭缝 其他检测器 MSD 进样器 高压泵 流动相 色谱柱 检测器 数据处理 化学工作站 建立液相色谱法的一般步骤 反相HPLC 极性:固定相 流动相 固定相 - 极性弱 流动相(甲醇, 乙腈等)- 极性强 极性小物质后出峰 正相HPLC 极性:固定相 流动相 固定相 - 极性强 流动相(己烷, 庚烷)- 极性弱 极性物质后出峰 正相色谱 20% 反相色谱 80% 正相色谱 20% 反相色谱 80% 与固定相极性相近tR长 主流 建立液相色谱法的步骤1 正相（反相、阴离子交换） 极性 氨基 正相（反相） 极性 氰基 反相或正相 弱极性 芳硝基 反相 非极性 苯基 反相、离子对 非极性 烷基C