《延胡索煎液中的生物碱含量测定.doc

? 延胡索煎液中的生物碱含量测定 一、实验内容 1.醋煮法制备延胡索(或用醋炒延胡索) 2.延胡索煎液总生物碱含量测定 3.延胡索煎液镇痛试验 二、目的要求 ????通过对延胡索炮制前后生物碱含量测定及镇痛试验，进而了解延胡索的炮制意义。 三、实验器材及药品 烧杯，电炉、分液漏斗、lOml容量瓶、回收装置、5ml刻度吸管、圆底烧瓶、碘瓶、碱式滴定管、注射器、秒表、计数器，氯仿、硫酸、氨水、无水硫酸钠、氢氧化钠、甲基红、溴甲酚绿、试纸、醋酸等。 四、实验方法 (一)炮制 1.延胡索??除去杂质，洗净，打碎成颗粒状，干燥。 2.醋延胡索 ?取净延胡索，加醋与适量水(平药面)，用文火加热，煮至透心，水干时取出，捣碎成颗粒状，干燥。 延胡索每100kg，用醋20kg。 (二)总生物碱的含量测定 1.样液制备??精密称取延胡索、醋延胡索各10g，分别置于500ml烧杯中，加水(200ml、100ml)煎煮2次，每次微沸20分钟，用脱脂棉过滤，加氨水调至pHl0以上，移入250m1分液漏斗中，用氯仿萃取至无生物碱反应，合并萃取液，加20ml蒸馏水洗涤，再用5ml氯仿洗涤水层，合并氯仿。加无水硫酸钠3g脱水后，回收氯仿至小体积；转入10ml容量瓶中，加氯仿至刻度，备用。 2.含量测定??精密吸取上述样品液5ml，至100ml锥形瓶中水浴挥去氯仿，加氯仿2ml溶解残渣，加0.0l(mol／L)硫酸20ml，水浴挥去氯仿，加甲基红－溴甲酚绿指示剂2滴，用0.02(mol／L)氢氧化钠液滴定，终点由红色变为绿色(或以电位测定法指示终点，等当点为pH5.1)。 计算方法：总生物碱含量以延胡索乙素计。每毫升0.01(mol／L)硫酸溶液相当于7.1084mg乙素。 (三)镇痛试验——化学刺激法 1.样品液的制备??取延胡索生品及醋制品各25g，水煎煮2次(400ml，250m1)微沸25分钟，过滤，浓缩至100ml备用。 2.试验方法??取小鼠30只，体重18～22g(雄性)随机分为三组，对照组给予等体积生理盐水，给药组分别灌以上述样液0.6ml／只，40分钟后，各鼠腹腔注射0.7％醋酸0.1ml／10g， 观察并记录15分钟内产生扭体反应的动物数或每组扭体反应的次数，与生理盐水组比较其镇痛效果。 五、注意事项 (1)水煎液因含淀粉而不易过滤，需用少量棉花过滤。 (2)萃取时出现乳化不易分层时，可用玻棒搅拌使其分层。 六、思考题 (1)延胡索的炮制方法有哪些?醋炙的原理，目的是什么?， (2)延胡索总生物碱的含量测定有哪几种方法? 实验九??中药炮制前后煎出物的比较 一、实验内容 1.饮片不同厚度其煎出物含量的比较(甘草、黄芩)。 2.种子类炮制前后其煎出物含量的比较(王不留行、牵牛子)。 3.动物类炮制前后煎出物含量的比较(穿山甲、鸡内金)。 二、目的要求 通过对一些中药炮制前后煎出物含量比较，了解中药炮制的目的。 三、实验器材及药品 烧杯、扭力天平、分析天平、250ml三角瓶、冷凝管、吸管(25ml、lOOml)、瓷蒸发皿、布氏漏斗、抽滤瓶(300m1)、水浴锅、干燥器等。 四、实验方法 (一)供试品制备 1.饮片的切制??取黄芩、甘草按规定的方法切成不同厚度的饮片。 黄芩2mm；甘草2mm。 2.种子类和动物类药物分别按规定的方法炮制。 (二)水溶物测定 ????分别取药材样品各约4g，称定重量(准确至0.01g)，置250ml三角瓶中，精确加水lOOml，塞紧，称定重量(准确至0.01g)，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过。精密量取滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小时，移置干燥器中，冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算供试品中含水溶性浸出物的百分数。 五、注意事项 (1)回流时注意控制火力，防止暴沸。 (2)吸取滤液时，不要搅拌，力求一次吸取。 六、思考题 ????根据中药炮制前后煎出物含量测定结果，说明中药炮制的目的和意义。 实验十??煅法 一、实验内容 1.明煅法：明矾、石膏、龙骨。 2.煅淬法：自然铜、炉甘石、代赭石。 3.扣锅煅法：棕榈、血余、灯心。 4.自然铜煅制前后含铁量比较。 二、目的要求 (1)了解煅法的目的和意义。 (2)掌握三种煅制方法的操作要点及火候、注意事项和质量标准。 三、工具设备 1.煅制??炉子、铁铲、锅、坩锅、烧杯、量筒、火钳、电炉、大小瓷蒸发皿，搪瓷盘、台秤、马福炉，盐泥、米醋等。 2.含铁量测定??电炉、石棉网、250m1三角烧瓶、玻璃漏斗、量杯、酸式滴管、分析天平，活性炭、硫酸-磷酸混合液、0.5％二苯胺磺酸钠、0.05(mo1／L)重铬酸钾标准液等。 四 实验