《季的花药培养》课件.ppt

5、植物组织培养技术与花药培养技术的异同点： 项目 相同点 不同点 植物组织培养技术 离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织，再分化成丛芽，诱导出根，然后进行移栽。 外植体为体细胞，染色体数无需加倍。 花药培养技术 取材为花药，培养的为单倍体幼苗，植株弱小，高度不育，必须用秋水仙素处理，使染色体加倍，恢复正常植株的染色体数，而且为纯种。 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 1、被子植物定义：凡是种子有果皮包被着，胚珠有子房壁包被着的植物，就叫做被子植物。 一、被子植物和裸子植物 2、裸子植物定义：凡是胚珠裸露，外面没有子房壁包被，种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物。 实例：玉米、大豆、梨、杏 实例：松、杉、柏 二、被子植物花粉粒的形成 花丝 花药：囊状结构，内有很多花粉粒 雄蕊的结构 雄蕊： 药隔：花药中部，由薄壁细胞构成，内有维管束 花药 花粉囊（4或2） 囊壁 花粉粒 表皮 纤维层 花药的结构 花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞 被子植物的花粉发育 ②花粉粒的形成 花粉母细胞 （小孢子母细胞） 减数分裂 ①经历时期： 四分体时期、单核期、双核期 四分体时期 （进入单核期） 有丝 分裂 单核靠边期(小孢子) 单核居中期(小孢子) 小孢子 （单核花粉粒） 精子 精子 有丝 分裂 花粉管细胞核 生殖细胞核 生殖细胞 营养细胞 双核期 两个精子和一个营养核的基因型相同 1花粉母细胞 4个小孢子 减分 有分 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有分 8个精子 ③花粉粒类型 一个成熟的花粉粒即为雄配子体，有两种情况： 二核花粉粒:成熟的花粉粒中，只含花粉管细胞核和生殖细胞核。（精子在花粉管中形成） 三核花粉粒:有些植物的花粉，在成熟前，生殖细胞进行一次有丝分裂，形成两个精子，这样的花粉在成熟时，含有一个营养核和两个精子。 四、产生花粉植株的两条途径 五、影响花药培养的因素 1、材料的选择 接种的花药时期 不同植物的诱导成功率很不相同，就同一种植物来说亲本的生理状况对诱导成功率也有直接影响 ②选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素 因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体，花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感。 选材是否成功是花药培养成功的关键 ①选材 一般来说，在单核期，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，花药培养的成功率最高。即：最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期 选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎； 选择单核期之后的花药接种，花瓣已有些松动，又给材料的消毒带来困难，且难以挑选到单核期的花药。 ③花药培养时期的选择 ④其它时期选择的缺点 ⑦花药培养时间 为了挑选到单核期的花药，通常选择完全未开放的花蕾。盛开的或略微开放的花，都不宜选作实验材料。 ⑥选择完全未开放花蕾的原因 完全未开放的花蕾，可挑选到单核期的花药，菌少、易消毒 ⑤单核期花药的挑选 一般月季的花药培养时间选在五月初到五月的中旬，即月季的初花期。初花期的花蕾营养状态及生理状态会比较好，可能提高花粉的诱导成功率 月季花药培养时的花粉粒最好是（ ） A、四分体时期 B、单核居中期 C、单核靠边期 D、二核或三核花粉粒 C 2、培养基： 花药培养基所采用的培养基可能因植物的不同而有所变化小麦中为N6，马铃薯、月季中为MS，油菜中为B5培养基 3、其他因素 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种的密度等对诱导成功都有一定的影响 六、实验操作 （一）材料的选取 ②某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 ①最常用的方法有醋酸洋红法 1、方法 ①醋酸洋红法染色机理 醋酸洋红为碱性染色剂，而花粉细胞内有染色体，染色体主要成分是DNA和蛋白质,易被碱性染料着色染成红色 。 将体积分数45％的醋酸100ml煮沸，缓缓加入1g洋红，在加热回流8h，冷却至50℃，过滤即可。 ②醋酸洋红的配置 2、醋酸洋红法 将花药放在载玻片上，加一滴质量分数1％的醋酸洋红，用镊柄将花药捣碎，盖上盖玻片在显微镜下检查。 ③染色操作 3、焙花青—铬钒法 将无水酒精与冰醋酸按体积比为3 ：1的比例混匀 ①卡诺氏固定液的配制方法 花药应该在卡诺氏固定液中固定20min，然后取出放在载玻片上，加焙花青—铬钒溶液