动物基因.ppt

2. 牛乳头瘤病毒载体 BPV转化细胞的鉴定：转化灶(focus) 五、腺病毒载体 1. 腺病毒（Adenovirus）的特点 分布广泛的呼吸道病毒，无包膜 线状双链DNA，36kb，可在寄主细胞内大量增殖 在腺病毒感染周期中，寄主蛋白质合成被关闭，因而能最大限度合成病毒编码的蛋白质 ITR：反向重复序列 E1-E4：早期基因，与病毒基因组复制的起始和晚期基因的表达调控有关 L1-L5：晚期基因，病毒包装蛋白 Ψ：包装信号 IVa2和VA：病毒型RNA聚合酶III的亚基基因，与宿主细胞的亚基装配成杂合的RNA聚合酶III 2. 腺病毒载体 ITR和Ψ是腺病毒基因组复制和包装必不可少的部分，除此之外的病毒基因组均可被置换 在辅助病毒帮助下产生重组腺病毒颗粒 慢病毒 慢病毒（Lentivirus）载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非 分裂细胞均具有感染能力。慢病毒载体的研究发展得很快，研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表达。在感染能 力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞，从而达到良好的的基因治疗效果，在美国已经开展了临床研 究，效果非常理想，因此具有广阔的应用前景。 转基因动物研究中出现的问题 制作转基因动物效率低 转基因表达不理想 转基因可能对宿主产生各种不利影响 一些环境和社会安全问题 （联合国于2000 年通过了《卡塔赫纳生物安全议定书》 ） 转基因动物发展前景 转基因动物可作为医用或食用蛋白的生物反应器 （至少已有3种转基因技术生产的重组蛋白用于临床试验：人凝血因子ＩX 、α1-抗胰蛋白酶 、α-葡萄糖苷酶 ） 周期短，成本低 可以决定后代性别 转基因动物是对多种生命现象本质深入了解的工具 建立多种疾病的动物模型 能提高动物育种效率 克隆移植时所需的器官和组织 An “Equivalent” Fish? Two 18-month-old Atlantic salmon Larger fish genetically engineered 2 genes added to fertilized eggs: 1 gene (from Chinook salmon) Produces growth hormones 1 gene (“promoter” from Ocean Pout) Disrupts salmon’s normal cycle Produces growth hormone year round. First transgenic animal seeking introduction to US markets 2008诺贝尔化学奖获奖三位科学家 下村修首次从Aequorea victoria中分离出GFP。他发现该蛋白在紫外线下会发出明亮的绿光。 Martin Chalfie证明了GFP作为多种生物学现象的发光遗传标记的价值。在最初的一项实验中，他用GFP使秀丽隐杆线虫的6个单独细胞有了颜色。 钱永健的主要贡献在于让人们理解了GFP发出荧光的机制。同时，他拓展出绿色之外的可用于标记的其他颜色，从而使科学家能够对各种蛋白和细胞施以不同的色彩。这一切，令在同一时间跟踪多个不同的生物学过程成为现实。? Possibilities for human cloning. ‘BAD’ (?) cloning. Replacement of lost relatives or propagation of megalomaniacs, dictators, scientists. Possibilities for human cloning. ‘BAD’ (?) cloning. Growing clones and harvesting heart etc. for transplantation Dodgy heart Make clone Erk! Better now Inject somatic skin cell nucleus into host oocyte. Make blastocyst-stage clone Possibilities for human cloning. ‘GOOD’ (?) cloning. Growing clones and harvesting heart etc. for transplantation D