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季的花药离体培养课件
课题2 月季的花药培养 植物的花药培养在育种上有什么意义? 花粉粒(1N) 单倍体植株(1N) 二倍体纯合子植株(2N) 缩短了育种周期,为新品种的培育开辟了新途径。 花的结构 花丝 花药:囊状结构,内有很多花粉 花粉是由花粉母细胞(即小孢子母细胞)经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。 花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期等阶段。 (一)被子植物的花粉发育 雄蕊 (一)被子植物的花粉发育 1花粉母细胞(2n) 4个小孢子(小孢子 四分体)(n) 减数分裂 有丝分裂 1个花粉管细胞核(n) 1个生殖细胞核(n) 有丝分裂 2个精子 单核居中期(n) 单核靠边期(n) 注意: ①二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管中形成) ②三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟时,含有一个营养核和两个精子。 ③两个精子和一个营养核的基因型相同。 (二)产生花粉植株的两种途径 形成原因:主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的配比 体细胞胚(胚状体): 在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为体细胞胚(胚状体)。 (三)影响花药培养的因素 1、材料的选择 不同植物 同一植物的不同生理状况(花期早期-初花期) 合适的花粉发育期(单核居中期与靠边期之间) 此外,植株生长条件、材料低温预处理、接种密度等 2、培养基的组成 实验操作 材料选取 材料和 消毒 接种和 培养 (一)材料选取 通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 ●最常用的方法:醋酸洋红法。 ●某些植物的花粉细胞核不易着色,采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。 二、材料的消毒: 花蕾 (70%酒精) 大约30s (无菌水) 清洗 (无菌吸水纸) 吸干水分 (1%氯化汞溶液) 2~4min (无菌水) 冲洗 月季花蕾的消毒与菊花外植体的消毒相比较,二者有何不同? 在酒精消毒前,花药不需要预先用流水冲洗、洗衣粉洗涤和软刷刷洗 三、接种和培养 剥取花药 接种花药 培养 分化培养基培养 鉴定和筛选 不要损伤花药? 要彻底除去花丝? 常常会出现染色体倍性的变化? 每个培养瓶接种 (7~10 ) 个花药? 花药长出愈伤组织还要转移到哪? 主要原因是营养核和生殖核融合造成的 植物组织培养技术与花药培养技术的异同点 项目 相同点 不同点 植物组织培养 技术 离体的植物组织经脱分化形成愈伤组织,再分化成丛芽,诱导出根,然后进行移栽。 外植体为体细胞,染色体数无需加倍。 花药培养技术 取材为花药,培养的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不育,必须用秋水仙素处理,使染色体加倍,恢复正常植株的染色体数,而且为纯种。 (2012全国卷新课标版)(15分)为了探究6-BA 和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响, 某研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA,配制 成四种培养基(见下表),灭菌后分别接种数量 相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体,在 适宜条件下培养一段时间后,统计再生丛芽外植 体的比率(m),以及再生丛芽外植体上的丛芽 平均数(n),结果如下表。回答下列问题: ( 1)按照植物的需求量,培养基中无机盐的元素可分为 和 两类。上述培养基中,6-BA属于 类生长调节剂。 2)在该实验中,自变量是 , 因变量是 , 自变量的取值范围是 。 3)从实验结果可知,诱导丛芽总数最少的培养基是 号培养基。 4)为了诱导该菊花试管苗生根,培养基中一般不加入 (填“6-BA”或“IAA”)。 生长素 细胞分裂素 细胞分裂素 IAA浓度 丛芽外植体的比率及丛芽平均数 0~0.5mg/L 1 6-BA 人有了知识,就会具备各种分析能力, 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书,广泛阅读, 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识, 培养逻辑思维能力; 通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平, 培养文学情趣; 通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我
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