羟基柠檬酸的来源_制备方法和性质.docx

源森生物主打藤黄果提取羟基柠檬酸的来源、制备及作用众所周知，羟基柠檬酸具有对脂肪合成、食欲和体重独特的调节作用，其作为柠檬酸的衍生物之一，已在国外制成药物用于心脏保护、减重和提高耐力等多个方面。本文中，将从羟基柠檬酸的来源、制备方法和性质方面来进行综述：一、羟基柠檬酸的发现（一）藤黄植物介绍羟基柠檬酸((-)-Hydroxycitric acid，(-)-HCA)存在于大量生长于印度次大陆和西斯里兰卡的某些藤黄果皮中，主要有Cambogia 、Indica 和 atro-viridis 藤黄，表1列出了这三种藤黄主要的植物学特征。　 Cambogia 藤黄果实太酸以至于无法生食，但果皮经熬煮后可用于治疗风湿病和肠道疾病 。它还被作为兽药用于牲畜口腔疾病治疗如作为漱口剂；而Indica 藤黄果实具有令人满意的香味和酸甜味，可作为配料赋予咖喱酸味，也可在热季时制作印度糖浆。该果实还可用于驱虫，也可用来治疗痔疮、痢疾、肿瘤、疼痛和心脏病。情绪不稳定时可喝一点由藤黄果汁制作的糖浆；上述二种果皮最有价值，被用来替代罗望子果或柠檬赋予咖喱酸味，故可作为调味料。在斯里兰卡，干果皮与盐一起使用来腌制鱼。Atroviridis 藤黄果皮太酸也无法生食，但是与糖一起煮制后味道极佳。在马来半岛，晒干的未成熟果皮作为酸味剂销售以代替罗望子果添加于咖喱中作为鱼的调味料。该水果还可与明矾一起使用作为固定剂应用于丝的染色。叶和根熬煮后可治疗耳痛。（二）(-)-HCA的发现Cambogia 藤黄果实经晒干，称之为 Marabar 罗望子果。在南印度西海岸被广泛应用于烹调目的和商品化科伦坡鱼的腌制。果实中的有机酸在腌制液中通过降低pH值而发挥着抑菌作用。该果实中含有30%酸(以柠檬酸干基重计)，过去曾被误认为是酒石酸和柠檬酸。该酸的水提取物在纸色谱上采用不同溶剂展开时，出现了二个主要酸的色斑，其与酒石酸和柠檬酸的斑点位置相当接近，但是在所有溶剂体系中Rf值显著性差异性都很小。采用Palmer的离子交换柱法对该果汁进行分析，则在对应于柠檬酸区域出现了最大峰。但是，该酸在酒石酸试验中测定酒石酸时以及在五溴丙酮试验中测定柠檬酸时都没有出现。Lewis等从Cambogia 藤黄果皮中分离出这一主要的酸，并依据化学和光学基础研究鉴定为(-)-HCA。在Whatman 1号滤纸上采用正丁醇/乙酸/水(4:1:5)和正丙醇/甲酸/水(4:1 :5)溶剂体系对(-)-HCA 进行鉴定和分离。用 5%偏钒酸盐喷雾鉴定斑点位置。一旦用过量碱对该酸混合物进行皂化，并上离子交换树脂柱(Zeocarb215)，洗出液仅在较低位置处出现一个斑点(Rf =0.34), 其对应于游离的(-)-HCA；一旦浓缩，洗出液则仅在较高位置出现一个斑点(Rf =0.46)，其对应于(-)-HCA内酯。采用二种不同溶剂体系进行洗脱时，果实提取物在图谱上出现二种主要酸的斑点。一旦用碱对该物质进行滴定,使用酚酞则在冷却中和煮沸后出现二个不同的末端，表现为内酯的特征。图谱上二个斑点已鉴定为羟基柠檬酸及其内酯(图1 和图 2)。很清楚，色谱上这二个斑点对应于γ-羟基酸和内酯的位置,而不是酒石酸和柠檬酸。二、源森生物羟基柠檬酸(-)-HCA 的分离和制备Lewis 等从Cambogia 藤黄果皮中大规模地分离得到(-)-HCA。该法由下述步骤组成:于减压(10lb/in2,15min)下用水煮制原料来提取酸，提取物经浓缩后，乙醇沉淀法脱去果胶，用碱中和澄清滤液，经阳离子交换树脂柱回收酸，酸再经浓缩和干燥得到粗产品。干燥粗产品再用醚提取，重结晶得到小针形结晶———内酯。Lewis还报道了另一种使用丙酮从Cambogia 藤黄中分离(-)-HCA的方法，丙酮提取物经浓缩，酸被水吸收，一旦蒸发水溶液回收丙酮。Moffett 等提出一种从藤黄果皮中水溶液提取(-)-HCA 的过程，该提取物上阴离子交换树脂柱以吸附(-)-HCA ，再用 NaOH/KOH 洗脱以释出(-)-HCA。藤黄果提取物经阳离子交换树脂柱得到游离酸。Guthrie等和Moffett等分别报道了由藤黄果皮制备(-)-HCA浓缩物的方法， 其中HCA 含量为23～54%，内酯含量为6～20%。三、源森生物羟基柠檬酸(-)-HCA 的立体化学性羟基柠檬酸，即1,2 -二羟基丙基-1, 2, 3-三羧酸，具有二个不对称中心。因此，可能存在二对非对映体或四个不同的异构体。Martius等已经合成了羟基柠檬酸四个可能存在的立体异构体，其中只有图1存在于藤黄中。羟基柠檬酸内酯的绝对构型经确定为(2S,3R)-2-羟基柠檬酸-2,5-内酯(图2)。根据赫德逊内酯规则、旋光色散曲线、圆二色性曲线和偏摩尔旋光等计算可测定绝对构型。Glusker 等利用X-射线晶体学测定