08.11.22高二生物《基因工程的基本操作程序》（课件）.ppt

① 概念：PCR全称为_______________，是一项在生物_____复制______________的核酸合成技术。 ③条件：_____________________________(前提条件)_______________________、 ___________ 、_____________________. ②原理：__________ 聚合酶链式反应 体外 特定DNA片段 DNA复制 一段已知目的基因的核苷酸序列 四种脱氧核苷酸 一对引物 (二)利用PCR技术扩增目的基因 ① 概念：PCR全称为_______________，是一项在生物_____复制______________的核酸合成技术。 ③条件：_____________________________(前提条件)_______________________、 ___________ 、_____________________. ②原理：__________ 聚合酶链式反应 体外 特定DNA片段 DNA复制 一段已知目的基因的核苷酸序列 四种脱氧核苷酸 一对引物 热稳定DNA聚合酶(Taq酶) (二)利用PCR技术扩增目的基因 ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数） ⑤结果： ⑥过程： ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数） ⑤结果： 指数 ⑥过程： ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数） ⑤结果： 指数 2n ⑥过程： ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数） ⑤结果： 指数 2n 使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增 ⑥过程： ④方式：以_____方式扩增，即____（n为扩增循环的次数） ⑤结果： 指数 2n 使目的基因的片段在短时间内成百万倍地扩增 ⑥过程： 变性、退火、延伸三步曲 退火：冷却至55～60℃部分引物与模板的单链DNA的特定互补部位相配对和结合 延伸：加热至70～75℃以目的基因为模板，合成互补的新DNA链 变性 退火 延伸 变性：加热至90～95℃双链DNA解链成为　　　单链DNA mRNA 反转录 cDNA (互补DNA） DNA聚合酶 双链DNA ②反转录法： 基因重组 反转录酶 mRNA cDNA 2. 构建基因文库 基因组DNA文库 cDNA文库 基因组DNA文库与cDNA文库的比较 ③根据已知的氨基酸序列合成DNA法： ③根据已知的氨基酸序列合成DNA法： 　　根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。 ③根据已知的氨基酸序列合成DNA法： 　　根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。 蛋白质的氨基酸序列 ③根据已知的氨基酸序列合成DNA法： 　　根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。 蛋白质的氨基酸序列 推测 ③根据已知的氨基酸序列合成DNA法： 　　根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。 蛋白质的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 推测 ③根据已知的氨基酸序列合成DNA法： 　　根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。 蛋白质的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 推测 推测 ③根据已知的氨基酸序列合成DNA法： 　　根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。 蛋白质的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 结构基因的核苷酸序列 推测 推测 ③根据已知的氨基酸序列合成DNA法： 　　根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，以单核苷酸为原料合成目的基因。 蛋白质的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 结构基因的核苷酸序列 推测 推测 化学合成 ③根据已知的氨基酸序列合成DNA法： 　　根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的信使RNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核