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微生物的营养剖析
根据形态分: 液体培养基——豆芽汁或麦芽汁蔗糖培养基 固体培养基——加入琼脂 ■下表示培养基A~D组成,含量为每升培养基中该成分的克数。 1、比较不同种类的抗生素 对某种菌的抑制作用 【比较抑菌圈直径】 菌落 ●菌落是单个微生物或孢子在适宜固体培养基上生长繁殖到一定程度形成肉眼可见、有一定形态结构的子细胞生长群体。 ●各种微生物在一定条件下形成的菌落特征(如大小、形状、边缘、表面、质地、颜色等)具有一定的稳定性,是鉴定菌种的重要依据。 ●菌落特征与微生物的菌体形态结构特征密切相关。细菌、酵母菌不形成菌丝,其菌落仅生长在固体培养基表面,可用接种工具将其全部挑起,即与培养基结合不紧密;而放线菌、霉菌的菌体大多分化为营养菌丝与繁殖菌丝,其营养菌丝深入培养基中吸取营养,故具有与培养基结合较紧,不易挑起等特征。 补充:活菌计数【稀释涂布平板法统计菌落数】 (1)理论依据:当样品稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌。 (因此,恰当的稀释度是成功统计菌落数目的关键。) (2)必须设置重复(至少涂布3个平板),以增强说服力和准确性。如果只涂布一个平板,结果不具有说服力。 (3)计算:每毫升原菌液活菌数=同一稀释度3个以上重复平皿菌落平均数×稀释倍数 【※若接种时不是1ml,如0.2ml,则还要×5 】 误差:由于两个或多个细胞连在一起时只能看到一个菌落,因此菌落数比实际活菌数要低! 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,土壤中的某些 微生物因为能够分泌纤维素酶而被用于服装面料的处理和秸秆 转化以生产酒精等。请就土壤中的纤维素分解菌的分离与计数 实验分析回答: (1)原理: ① 纤维素分解菌分泌纤维素酶,纤维素酶催化纤维素水解, 最终生成葡萄糖。刚果红(简称CR)染料能与多糖形成 红色复合物,但不和葡萄糖发生此反应; ② 含有刚果红和纤维素的培养基上生长的纤维素分解菌 菌落周围出现透明圈。 (2)仪器和试剂: 纤维素分解菌的选择培养基(以纤维素作为唯一碳源的 液体培养基)、鉴别用的平板(含有纤维素和CR染料的 固体培养基),各种无菌操作仪器等。 (3)实验方法与步骤(如图): ①土壤取样:选取腐殖土10g。 ②培养基配制:教师提供选择培养基,学生自配鉴别用的平板。 ③选择培养:在无菌条件下将土样加入装有30ml选择培养基的摇 瓶中,30℃下振荡培养2d,至培养基浑浊。 ④样品稀释:取菌液按照上图进行等比梯度稀释,稀释最大倍数 至106。 (4)结果与分析: ①选择培养的第2天,培养液出现浑浊,这说明 。 选择培养的目的是 。如果选取多年积累的枯枝败叶, 一般无须进行选择培养,因为__________。 ②如果图中稀释105倍的3个平板上的菌落数分别为48、52、50 个,则每毫升原菌液活菌数 个,这一数值比实际活菌数 要 (高/低),因为 。若同学A从上图稀释105倍 的培养基中筛选出150个菌落,远高于其他同学的结果,则 可能的原因之一是 。请你通过设置对照来确定 该原因___________。 ③有同学提出:虽然用符合要求的培养基严格进行无菌培养, 但鉴别平板上不一定只是纤维素分解菌,可能的原因是 。 因此,还必须进一步选择、鉴定。 2、营养物质浓度及配比合适 营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用 如:生产谷氨酸的过程中 C/N=4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少 C/N=3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。 3、灭菌和控制PH值 高温高压灭菌 细菌与放线菌:ph7~7.5范围内 酵母菌和霉菌通常在ph4.5~6范围内生长。 10g土样 30ml 选择培养基 10g土样 30ml 选择培养基 (3)实验方法与步骤(如图): ①土壤取样:②培养基配制:③选择培养:④样品稀释: ⑤接种培养:将稀释104~106倍的稀释液各取0.1ml滴加在平板 培养基(鉴别用)上用无菌玻璃刮铲涂匀,在30℃下倒置培 养,至菌落长出,每个稀释度下需涂布3个平板。 ①
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