第1章色譜分析法和气相色谱法.ppt

本章重点： 1. 理解色谱分离的基本原理； 2. 掌握色谱法的基本概念和术语； 3. 掌握色谱法的定性和定量方法; 4. 了解气相\液相色谱的分析原理、仪器结构 和在食品分析中的应用. 1.2 色谱法分类 1.3 色谱法的特点 1.4 色谱曲线图及有关术语 （二）色谱峰 由检测器输出的信号强度对时间作图，所得曲线称为色谱流出曲线。曲线上突起部分就是色谱峰。 基线：在实验操作条件下，色谱柱后没有样品组分流出时的流 出曲线称为基线，稳定的基线应该是一条水平直线。 峰高：色谱峰顶点与基线之间的垂直距离，以（h）表示。 （三） 保留时间tR 试样从进样到柱后出现峰极大点时所经过的时间，称为保留时间，如下图。 组分在色谱柱中的保留时间tR包含组分通过柱子的时间和组分在固定相中滞留的时间，所以tR实际上是组分在固定相中保留的总时间。 （四） 分离度 1.5 定性和定量分析 1 定性分析 在色谱条件一定时，任何一种物质都有确定的保留时 间。 通过比较已知物和未知物的保留参数或在固定相 上的位置，即可确定未知物是何种物质。 2 定量分析 在一定色谱条件下，组分i的质量（mi）与检测器响应讯号（峰面积Ai）成正比。色谱定量分析的依据 1mg样品溶解后，经过高效液相色谱分析后得到4个峰，经验证样品中只有4种物质，那么每种物质所占比例与对应峰面积所占比例一致。即 M1=1mg ×[A1/(A1+A2+A3+A4)] 验证方法：薄层色谱法最常用。二极管阵列检测器 练习题： §2 气相色谱法 液体进样装置和汽化室 3.分离系统 4.温控系统 5.检测和数据处理系统 这个系统是指样品经色谱柱分离后，各成分按保留时间不同，顺序地随载气进入检测器，检测器把进入的组分按时间及其浓度或质量的变化，转化成易于测量的电信号，经过必要的放大传递给记录仪或计算机，最后得到该混合样品的色谱流出曲线及定性和定量信息。 1 热导检测器（TCD） (2) 检测原理 进样后: 3.电子捕获检测器(ECD) 特点:电子捕获检测器是一种选择性很强的检测器, 目前分析 痕 量电负性有机物最有效 的检测器，对具有电负性物质（如含卤素、硫、磷、氰等的物质）的检测有很高灵敏度（检出限约1O-14g/ml）。 缺点: 线性范围窄，只有103左右，且响应易受操作条件的影响，重现性较差。 应用:电子捕获检测器已广泛应用于农药残留量、大气及水质污染分析，以及生物化学、医学、药物学和环境监测等领域中。 2.3 检测器性能评价指标 灵敏度（S） ： S 表示单位质量的物质通过检测器时，产生的响应信号的大小。S值越大，检测器（也即色谱仪）的灵敏度也就越高。检测信号通常显示为色谱峰，则响应值也可以由色谱峰面积（A）除以试样质量求得： S = A / m 无论哪种检测器，检出限都与灵敏度成反比，与 噪音成正比。检出限不仅决定于灵敏度，而且受限 于噪声，所以它是衡量检测器性能好坏的综合指标。 2.4 气相色谱法在食品领域中的应用 食品中呈香呈味物质的检测。 香精香料的检测。 食品中农药残留量检测。 其他小分子油脂等易挥发成分的检测。 2.5 图形分析 问题：两个峰出峰时间相隔太远。 方法：适当调高气化室、色谱柱或检测器温度；增加流动 相流速。 气相色谱仪工作原理? 气相色谱仪的组成部分? 气相色谱常用检测器种类 需要控制温度的部位？为什么要控制温度？ 汽化室的作用及要求？ 流动相流速对峰型有哪些方面的影响？ 进样量对峰型有哪些方面的影响？ 温度是色谱分离条件的重要选择参数； 气化室、分离室、检测器三部分在色谱仪操作时均需控制 温度. 气化室：保证液体试样瞬间气化，一般比分离室温度高50 - 100度； 分离室：准确控制分离需要的温度。当试样复杂时，分离 室温度需要按一定程序控制温度变化，各组分在 最佳温度下分离； 检测器：保证被分离后的组分通过时不在此冷凝； 色谱柱的温度控制方式有恒温