第二章紫外-可見光谱分析法.ppt

（2）标准对照法 （比较法）　 若试样中只有被测组分在λmax处有吸收，且符合朗伯-比耳定律，则配制一与待测样品浓度接近的标准溶液，在相同条件下显色，在同一波长处测定吸光度，根据下式可计算出待测样品的浓度。 Ａ样＝εbc样 Ａ标＝εbc标 在1cm比色皿和525nm时，1.00×10-4mol/LKMnO4溶液吸光度为0.585。现有0.5g锰合金试样，溶于酸后，用高碘酸盐将锰全部氧化成MnO4-。然后移至500mL容量瓶中。在1cm比色皿和525nm时，测得吸光度为0.400。求试样中锰的百分含量（Mn：54.94）。 2、多组分同时测定 当溶液存在两种或两种以上待测组分时，用分光光度法可同时测定。若溶液中存在两种组分X和Y，它们的吸收光谱一般可有如下两种情况。 ① 吸收光谱不重叠。吸收光谱不重叠或至少能找到在波长λ1 时X有吸收而Y不吸收，在波长λ2 时Y有吸收而X不吸收，如图所示，此时可在波长λ1处测定X的含量，可在波长λ2处测定ｙ的含量，相互不干扰。 ② 吸收光谱重叠 当组分x和组分y的吸收光谱重叠时，如图所示。可选定两组分吸光度相差较大的波长λ1和λ2，测定吸光度。若各组分的吸光性能符合比耳定律，则其总吸光度为各组分吸光度之和（吸光度加合性），在波长λ1 和λ2处测定吸收度A1 和A2，可得到如下联立方程： A1＝εX1 bcx＋εy1bcy A2＝εX2bcx＋εy2bcy 式中，cx、cy分别为ｘ和ｙ的浓度；εX1、εy1分别为x和y在λ1处的摩尔吸光系数；εX2、εy2分别为x和y在λ2处的摩尔吸光系数。 摩尔吸光系数可以分别用ｘ和ｙ标准溶液在波长λ1和λ2处测定吸光度后求得。 为测定含A和B两种有色物质中A和B的浓度，先以纯A物质做工作曲线，求得A在λ1 和λ2时εA1 =4800L/(mol·cm)和εA2 =700L/(mol·cm)；再以纯B物质做工作曲线，求得εB1 =800L/(mol·cm)和εB2 =4200L/(mol·cm)；对试液进行测定，得A1=0.580与A2=1.10。求试液中A和B的浓度。在上述测定时均用1cm比色皿。 0.58=4800cA+800cB 1.10=700cA+4200cB 解方程组得cA=7.94×10-5 mol/L； cB=2.48×10-4 mol/L。 Thank You! 二、影响光吸收定律的主要因素 根据吸收定律，在理论上，吸光度对溶液浓度作图所得的直线的截距为零，斜率为εb。实际上吸光度与浓度关系有时是非线性的，或者不通过零点，这种现象称为偏离光吸收定律。 如果溶液的实际吸光度比理论值大，则为正偏离吸收定律；吸光度比理论值小，为负偏离吸收定律。 1、入射光非单色性引起偏离 吸收定律成立的前提是入射光是单色光。但实际上，一般单色器所提供的入射光并非是纯单色光，而是由波长范围较窄的光带组成的复合光。而物质对不同波长的吸收程度不同（即吸光系数不同），因而导致了对吸光定律的偏离。 2、溶液的化学因素引起偏离 溶液中的吸光物质因离解、缔合，形成新的化合物而改变了吸光物质的浓度，导致偏离吸收定律。因此，测量前的化学预处理工作十分重要，如控制好显色反应条件，控制溶液的化学平衡等，以防止产生偏离。 3、比尔定律的局限性引起偏离 严格地说，比尔定律是一个有限定律，它只适用于浓度小于0.01mol/L的稀溶液。因为浓度高时，吸光粒子间平均距离减小，以致每个粒子都会影响其邻近粒子的电荷分布。这种相互作用使它们的摩尔吸光系数ε发生改变，因而导致偏离比尔定律。为此，在实际工作中，待测溶液的浓度应控制在0.01mol/L以下。 第四节 紫外-可见分光光度计 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 信号显示系统 I0 参比 It 样品 1.光源 光源的作用是供给符合要求的入射光。分光光度计对光源的要求是：在使用波长范围内提供连续的光谱，光强应足够大，有良好的稳定性，使用寿命长。 在可见区常用的光源为钨灯或卤钨灯，可用的波长范围为320～1000nm；在紫外区常用的光源为氢灯和氘灯，它们发射的连续光波长范围为185～375nm，其中氘灯的辐射强度大、稳定性好、使用寿命长。 2.单色器 单色器是将光源辐射的复合光分成单色光的光学装置。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或凹面反射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光