專题1基因工程课件新人教版选修3.ppt

第一步：获取目的基因方法： 1.从基因文库中获取目的基因。 2.利用PCR技术合成DNA 3. mRNA差异显示法获得目的基因 （反转录） 4.采用DNA合成仪人工合成长度不是很大的DNA片段。 5.用机械的方法，如超声波把打成片段。 原核生物基因表达的调 控 乳糖代谢基因表达调控图解：(有乳糖时) Ｒ Ｐ Ｏ lacZ lacY lacA 调节基 因 启动 子 操纵基 因 结构基 因 RNA聚合酶 信使 RNA 转 录 翻 译 阻抑物与乳糖结合后构象发生了改变，因而不能与 操纵基因结合，使得结构基因进行转录。 阻抑 物 乳糖 转 录 半乳糖苷酶 酶 酶 第二步： 基因表达载体的构建 核心 目的基因与载体结合成为重组基因 需要 哪两种 工具 总结：表达载体需由哪几部分组成 复制原点 启动子 目的基因 终止子 标记基因 它们的作用是？ 第三步：将目的基因导入受体细胞 将目的基因导入植物细胞 将目的基因导入动物细胞 将目的基因导入微生物细胞 什么叫转化 常用的转化方法有哪些？ 具体过程？ 第四步：目的基因的检测与鉴定 首先： 其次： 最后： 还要： 检测与鉴定哪些环节 具体 方法？ DNA分子杂交技术 基因探针：核酸分子探针是指特定的已知核酸片段，能与互补核酸序列退火杂交，用于对待测核酸样品中特定基因顺序的探测。 满足：（1）必须是单链，（2）带有容易被检测出来的标记物。 编码区上游 编码区下游 RNA聚合 酶结合位点 RNA聚合 酶结合位点 编码 蛋白质 调控 调控 原核细胞 真核细胞 真核细胞 * 专题1 基因工程 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品。 基础理论  和技术的发展 催生了基因工程 阅读课本第2页 1.1 DNA重组技术的基本工具 是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切” 和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品 分析概念： 工 具 为什么 要加工 什么是 表达 用什么 导入 基因操作的工具 基因的剪刀（分子手术刀） ——限制性核酸内切酶（限制酶） 基因的针线（分子缝合针） ——DNA连接酶 ?基因的运输工具（分子运输车） ——运载体??? 到哪里去寻找这种酶 （1）限制酶???  ①分布：主要在原核生物中。 ②作用特点:专一性，识别特定核苷酸序列，切割特定切点。 ③结果：产生黏性未端和平末端??? ④举例：EcoR1限制酶、Sma1限制酶??? 与我们学过的 DNA酶相同吗？ 识别序列的特点 作用是什么 两者的区别 这两种酶切的特点 切断的是什么键 限制酶的识别特点 以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称，重复排列 如：GAA TTC CCC GGG CTT AAG GGG CCC 黏性末端 黏性末端 EcoRI 什么叫黏性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 要想获得某个特定性状的基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？ 要切两个切口，产生四个黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，就似乎可以合成重组的DNA分子了。 基因的针线：DNA连接酶 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 同种限制酶切割 （2）DNA连接酶???  ①连接的部位：磷酸和脱氧核糖之间的键： 磷酸二酯键（梯子的扶手） ②结果：将两个相同的未端