【2017年整理】刺激隐核虫幼虫诱导的斜带石斑鱼体液免疫应答.doc

PAGE 摘 要 刺激隐核虫是一种纤毛类寄生虫，对水产养殖和观赏鱼类造成了极大危害，在短时间内就会引发严重感染和高死亡率，对经济生产造成了很大的损失。本文就刺激隐核虫的幼虫阶段所引起的体液免疫应答过程进行研究，以期能找到具有最高免疫原性和免疫保护性的免疫原，为以后疫苗的研制与开发奠定基础。 刺激隐核虫的生活周期的四个阶段（见图示），我们采用的是Colorni和Burgess(1997)的术语：滋养体(trophont)、胞囊前体(protomont)、胞囊(tomont)和幼虫(theront)。腹腔注射刺激隐核虫幼虫能使斜带石斑鱼的血清和皮肤培养液产生阻动隐核虫幼虫的特异性抗体，并能使免疫鱼获得很好的免疫保护，刺激隐核虫生活史的三个发育阶段中，只有幼虫期具有较好的免疫原性，而其它两个阶段免疫原性较差。可以将幼虫期作为首选来研制灭活疫苗，为防御和治疗刺激隐核虫病奠定了基础。所以，从我们的研究结果来看，刺激隐核虫病的预防和防治应该从幼虫期为出发，进行灭活疫苗疫苗或者基因工程疫苗的研究。 在本实验中，相同的免疫方法所引发的血清抗体和皮肤抗体的变化规律存在很大的差别，两类抗体的最初生成时间、达到峰值的时间以及阻动效价等都不一致，这说明鱼类的系统免疫应答和皮肤粘膜免疫应答是相互独立的。 关键词：刺激隐核虫 幼虫 免疫 活疫苗 鱼类 目 录 TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc229910435 1 前言 PAGEREF _Toc229910435 \h 1 HYPERLINK \l _Toc229910436 1.1 关于刺激隐核虫的研究 PAGEREF _Toc229910436 \h 1 HYPERLINK \l _Toc229910437 1.2 关于斜带石斑鱼的研究 PAGEREF _Toc229910437 \h 2 HYPERLINK \l _Toc229910438 1.3 刺激隐核虫各生活阶段的研究 PAGEREF _Toc229910438 \h 2 HYPERLINK \l _Toc229910439 1.4 本实验的目的与意义 PAGEREF _Toc229910439 \h 3 HYPERLINK \l _Toc229910440 2 材料和方法 PAGEREF _Toc229910440 \h 3 HYPERLINK \l _Toc229910441 2.1 实验鱼的来源、检测及驯养 PAGEREF _Toc229910441 \h 3 HYPERLINK \l _Toc229910442 2.2 刺激隐核虫幼虫的来源 PAGEREF _Toc229910442 \h 4 HYPERLINK \l _Toc229910443 2.3 实验分组 PAGEREF _Toc229910443 \h 5 HYPERLINK \l _Toc229910444 2.4 免疫方法 PAGEREF _Toc229910444 \h 5 HYPERLINK \l _Toc229910445 2.5 抗血清的制备方法 PAGEREF _Toc229910445 \h 5 HYPERLINK \l _Toc229910446 2.6 皮肤培养液的制备方法 PAGEREF _Toc229910446 \h 5 HYPERLINK \l _Toc229910447 2.7 血清抗体和皮肤培养液阻动效价的测定 PAGEREF _Toc229910447 \h 6 HYPERLINK \l _Toc229910448 2.8 幼虫对实验鱼致死剂量的测定 PAGEREF _Toc229910448 \h 6 HYPERLINK \l _Toc229910449 2.9 攻毒 PAGEREF _Toc229910449 \h 6 HYPERLINK \l _Toc229910450 2.10 数据统计方法 PAGEREF _Toc229910450 \h 6 HYPERLINK \l _Toc229910451 3 结果 PAGEREF _Toc229910451 \h 6 HYPERLINK \l _Toc229910452 3.1 抗体对幼虫的阻动过程 PAGEREF _Toc229910452 \h 6 HYPERLINK \l _Toc229910453 3.2 抗血清阻动效价的变化规律 PAGEREF _Toc229910453 \h 9 HYPERLINK \l _Toc229910454 3.2 皮肤培养液阻动效价的变化规律 PAGEREF _Toc229910454 \h 10 H