提取分离鉴定方法剖析.ppt

溶剂法 水蒸气蒸馏法 升华法 调节温度 温度不同——溶解度改变 结晶、重结晶 2.改变混合溶剂极性 加另一种极性相差较大的溶剂 混合溶剂极性改变 部分物质沉淀析出 A． 水/醇法：除去水提液中的水溶性杂质 B． 醇/水法：除去醇提液中的脂溶性杂质 C． 醇/醚法（醇/丙酮法）：纯化皂苷 3.调节PH 酸、碱、两性成分 调节PH——改变分子的存在状态——改变溶解度 A．酸/碱法（酸提取碱沉淀法）： 生物碱的提取、纯化 B．碱/酸法（碱提取酸沉淀法）： 黄酮、蒽醌等酚性成分的提取、纯化 C. 调节PH至等电点，沉淀蛋白 4.加沉淀剂 酸、碱成分——加入某种沉淀试剂——水不溶性盐 A．酸性成分 Pb2+、Ba2+ 、Ca2+ ? ? 水悬浮，通H2S 母液（?） B. 碱性化合物 苦味酸/苦酮酸，磷钼酸/磷钨酸/镭氏盐 ? ? 强H+ ，Et2O萃取 H2O层（?） （二）根据物质吸附性差别进行分离 色谱又称层析法，是一种物理化学分析方法，它利用不同溶质（样品）与固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，当两相做相对移动时，各溶质在两相间进行多次平衡，使各溶质达到相互分离。 色谱法 色谱法（chromatography）又称层析法，是一种分离和鉴定化合物的有效方法，其最大的优点在于分离效能高、快速简便。对一些结构性质相似化合物的分离，用经典的萃取法、沉淀法和结晶法等难以达到分离目的时，用色谱法往往可以收到很好的分离效果。 基本原理：利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作用性能的差异，混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。 分类: 按流动相的分子聚集状态分类: GC、LC、SFC 等 按固定相的分子聚集状态分类: GSC、GLC、LSC、LLC等 按操作形式分类: 柱色谱法、平面色谱法、毛细管电泳法等 按色谱过程的分离机制分类: 分配色谱法、吸附色谱法、离子交换色谱法、 空间排阻色谱法、毛细管电泳法等 实现色谱操作的基本条件是必须具备相对运动的两相，固定相(stationary phase)和流动相(mobile phase)。 　　 色谱过程是组分的分子在流动相和固定相间多次“分配”的过程。 组分的结构和性质微小差异 与固定相作用差异 随流动相移动的速度不等 差速迁移 分离 1.吸附剂的类型 物理吸附：也称表面吸附, 由分子间力的相互作用所引起。 特点：无选择性，吸附与解吸可逆，可快速进行，在实际工 作中用得最广。如硅胶、氧化铝。 化学吸附：黄酮等酚酸性物质被碱性氧化铝吸附， 或生物碱被酸性硅胶吸附等。 特点：有选择性，吸附牢固，有时不可逆，故很少使用。 半化学吸附：如聚酰胺对黄酮类、醌类等化合物之间的氢健吸附，力量较弱，介于上述二者之间。 吸附过程三要素：吸附剂、溶质、溶剂 吸附剂：常用吸附剂：硅胶、氧化铝及活性炭（硅胶、氧化铝为极性吸附剂；活性炭为非极性吸附剂）。 硅胶：表面是硅醇基，酸性极性吸附剂 使用硅胶注意点： 硅胶的吸附能力随着吸附的水分增加而下降，若吸水量超过17%，吸附力极弱，不能作为吸附剂，但可作为分配色谱的支持剂； 硅胶活化温度为105℃，活化时间为30分钟； 硅胶是一种酸性吸附剂，适用于分离酸性和中性化合物； 吸附剂的用量一般为样品量的30～60倍，样品极性较小、难以分离者,用量可适当提高； 硅胶型号：硅胶G、硅胶H、硅胶F254 粒度：60~100目（柱色谱用）；200目（薄层色谱用） 氧化铝：分三种类型 碱性氧化铝：含Na2CO3 适用于碱性物质的分离； 中性氧化铝：碱性氧化铝水洗至中性； 酸性氧化铝：用稀HNO3或HCl处理； 活性炭：是非极性吸附剂，与硅胶、氧化铝相反,对非极性物质具有较强的亲和能力。从活性炭上洗脱被吸附物质时,洗脱溶剂的洗脱能力将随溶剂极性的减弱而增强： 100%醇含水醇H2O 应用：脱色等 溶剂 溶剂在柱色谱中流动相叫洗脱剂；在TLC和PPC中叫展开剂。 常见溶剂的洗脱能力顺序为： 己烷、苯、乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇、水 注：对极性吸附剂洗脱能力依次增强 对非极性吸附剂洗脱能力依次减弱 一般应用时选择二种或三种不同极性的溶剂混合使用，以达到最佳分离效果。 CH3OH-H2O （7:3）