葡萄酒中鐵含量测定.docVIP

葡萄酒中铁含量测定 实验目的 熟练掌握分光光度计的操作方法 掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的原理和方法 学习吸收光谱分析法的实验条件的选择 实验原理 葡萄酒是以新鲜葡萄为原料发酵而成的酿造酒。在酿造过程中，葡萄浆果里的糖经酵母菌的作用，分解为酒精及其副产物。葡萄浆果中的其他成分(如单宁、色素、芳香物质等)以不变化的形式转移到葡萄酒中，因而葡萄酒营养丰富。葡萄酒中含有铁，而铁又是造成葡萄酒变质的重要因素，因此铁的测定就显得格外重要。葡萄酒中的铁几乎全部处于络合状态，以铁和亚铁络合物存在，这些络合物一般是比较稳定的，但是也能电离出少量的Fe3+和Fe2+。测定含量时，首先需要还原剂盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+，与邻啡罗啉作用生成红色螯合物，其颜色的深浅与铁含量成正比，用分光光度法进行铁的测定。显色反应条件是影响测定灵敏度和准确度的主要因素。显色反应条件包括显色剂的用量、溶液酸度、显色反应时间和反应温度及干扰物质等，均需一一研究以便制定最佳分析方案。 实验材料 分光光度计，浓硫酸，过氧化氢溶液，氨水，盐酸羟胺溶液(1OOg／L)，邻啡罗啉溶液(1.2g／L)，铁标准溶液(1O0mg／L)，铁标准使用液(1Omg／L)。 实验方法及数据处理 测定条件的研究 波长的选择 取10.00mL浓度为10mg／L的铁标准使用液于50mL容量瓶中，加1OOg／L盐酸羟胺溶液1ml，摇匀，放置2min，然后加入5ml乙酸一乙酸钠溶液，2mL1.2g／L邻啡罗啉溶液，然后加蒸馏水至刻度，摇匀。用1.00cm吸收池，以试剂空白作参比，于各种波长处，采用721分光光度计测定吸光度。然后在不同的波长下测定其吸光度值，绘制吸收光谱曲线（波长为横坐标，吸光度为纵坐标）。 波长/nm 440 450 460 470 480 490 500 505 510 515 520 530 540 550 560 A 0.285 0.299 0.323 0.361 0.375 0.381 0.394 0.400 0.407 0.400 0.381 0.306 0.211 0.122 0.069 图一 不同波长下的吸光度 1.2 显色时间的测定 装入1.00吸收池的上述显色试液，在 510nm 波长下，以纯水为参比溶液，测定显色反应时间分别为 5min、10min、20min、30min，40min、1h 时显色产物的吸光度，确定显色反应时间。 t/min 8 10 20 30 40 60 A 0.397 0.398 0.410 0.412 0.414 0.419 图二 不同显色时间下的吸光度 显色剂用量的确定 取7只50mL容量瓶，分别加入10.00mL浓度为10mg／L的铁标准使用液于各容量瓶中，并加入1OOg／L盐酸羟胺溶液1ml，摇匀，放置2min后，再分别加入5ml乙酸一乙酸钠溶液，然后在各容量瓶中分别准确加入1.2g／L邻啡罗啉溶液0.20、0.40、0.60、1.50、2.00、3.00ml，然后加蒸馏水至刻度，摇匀。用1.00cm吸收池，以试剂空白作参比，于波长510nm处，采用721分光光度计测定吸光度。以显色剂体积为横坐标，以相应吸光度为纵坐标，绘制吸光度对显色剂用量的曲线，从而确定在测定过程中应加入的显色剂体积。 V邻菲罗啉/mL 0.00 0.20 0.40 0.60 1.50 2.00 3.00 A 0.000 0.107 0.192 0.301 0.387 0.386 0.387 图三 不同显色剂体积下的吸光度 1．4 溶液酸度的确定 取100ml容量瓶，加入铁标准溶液(1O0mg／L)10.00ml，加入10ml 2mol/L HCl和 10ml 1OOg／L盐酸羟胺溶液，摇匀，2min 后加入20 ml 1.2g／L邻啡罗啉溶液，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。 取7只50mL容量瓶，分别加入10.00mL上述溶液，再分别加入 0.4mol/L NaOH 溶液 0.00、1.00、2.00、4.00、5.00、7.00、9.00ml，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀。测定个溶液pH值，在 510nm 波长下，以纯水为参比溶液，测定吸光度。以溶液pH值为横坐标，对应的吸光度为纵坐标，绘制A-pH曲线，确定适宜pH范围。 PH 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 A 0.073 0.272 0.384 0.393 0.192 0.134 0.071 图四 不同pH下的吸光度 2.试样中铁含量的测定 2.1 试样的处理 吸取酒样 1.00 mL于 10 mL凯氏烧瓶中，置电炉上缓缓蒸发至近干，取下稍冷后，加1 mL浓硫酸（根据含糖量增减）、1 mL过氧化氢，于通风厨内加热消化。