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金边瑞香不定芽的增殖培养 陈志萍 闵 炜 （上海农林职业技术学院，上海松江：201600） 摘要：通过两次单因子试验，研究了BA（0.5~5mg·L-1）和NAA（0.1~1mg·L-1）在金边瑞香不定芽增殖培养中的作用。BA在诱导产生不定芽的过程中起着主导作用。BA浓度在0.5mg·L-1时，培养6周产生的不定芽总数不多，但有效芽（﹥1cm）相对较多,平均3.9个，随着BA使用浓度增加，产生的不定芽总数增多，但有效芽数量减少，BA浓度在3 mg·L-1以上时，平均只有1个有效芽。NAA浓度在0.2~0.5mg·L-1范围内，平均有效芽数在3.8~3.6个，浓度增加到1mg·L-1时，有效芽数减少到平均1.8个。试验确定合适的不定芽增殖培养基为MS+ BA0.5mg·L-1+ NAA0.2mg·L-1。 关键词：组织培养；金边瑞香；不定芽增殖；单因子试验 金边瑞香（Daphan odora var. marginata）是瑞香科瑞香属的一个变种，叶缘金黄色，花淡紫红色，气味芬芳，与长春和尚君子兰、日本五针松一起被推崇为近代园艺三宝，为我国传统名花，也是世界名花而倍受人们喜爱，其市场销量也日益增长。 在金边瑞香的产地仍然以扦插繁殖为主，这种繁殖方式容易使带病毒的植株繁殖后导致后代产生退化而影响其观赏价值。通过茎尖组织培养可以减少后代植株的病毒，而且繁殖系数大，适合于工厂化育苗。本试验在获得金边瑞香茎尖试管芽苗的基础上，研究细胞分裂素和生长素在其组织培养快速增殖中的作用。 1材料和方法 1.1 试验材料 切取在初代培养基中生长的金边瑞香愈伤组织上再生的2~3cm长的健壮芽苗，转接入不含植物生长物质的MS培养基（MS0）中，经二周左右的短期培养，选叶片展开、生长状况较一致的芽苗作增殖培养的材料。 1.2培养基 增殖培养基为MS基本培养基，添加3%蔗糖，并附加不同浓度的生长素（NAA）和细胞分裂素（BA），pH值5.8。 根据前期试验的结果，设置两次单因子试验来分步筛选最佳的BA和NAA的浓度配比。首先固定NAA的浓度为0.2mg L-1，BA浓度变化在0.5~5mg.L-1范围，BA和NAA的配比组合见表1。 表1 NAA0.2和BA不同浓度组合 Table 1 Combination of NAA0.2 and BA with different concentrations 编号 处理组合（mg·L-1 ） 1 MS + BA0.5 + NAA0.2 2 MS + BA1 + NAA0.2 3 MS + BA2 + NAA02 4 MS + BA3 + NAA0.2 5 MS + BA4 + NAA0.2 6 MS + BA5 + NAA0.2 根据第一次试验的结果，再固定BA的浓度为0.5mg L-1， NAA浓度变化在0.1~1mg .L-1范围，得BA和NAA的配比组合见表2。 表2 BA0.5 和NAA不同浓度组合 Table 2 Combination of BA0.5 and NAA with different concentrations 编号 处理组合（mg·L-1） 1 MS + BA0.5 + NAA0.1 2 MS + BA0.5 + NAA0.2 3 MS + BA0.5 + NAA0.5 4 MS + BA0.5 + NAA1 1.3 试验方法 将在MS0培养基中生长状况较一致的芽苗剪成2cm长，转入分装50ml不同处理培养基的直径为6cm的培养瓶中，每瓶接一枚芽苗，每个处理接20瓶。培养温度24±1℃,光照强度20μmol.m-2.s-1,光照时间12h.d-1。 接入增殖培养基后一周开始观察各处理芽苗的生长状况，至第6周调查记录增殖的芽苗数，以大于1cm长的芽为有效芽，按随机设计进行方差分析[1]，比较各处理的差异。 2结果与分析 2.1 BA对芽苗增殖生长的影响 2.1.1 BA对芽苗生长的影响 BA的使用浓度在0.5mg·L-1时，培养6周芽苗的顶芽伸长1cm左右，茎基部生直径1～2cm左右的蓬松愈伤组织，上面萌生不定芽，长2～3cm，叶片展开正常。BA使用浓度在1mg·L-1时，顶芽伸长量比在0.5mg·L-1时要少，茎基部生直径3cm左右的蓬松愈伤团块，上面的不定芽粗短，大部分的长度不到1cm，并且叶片小而尖。BA浓度在2mg·L-1时，茎基部的愈伤团更大，上面的不定芽小而密集，长度大于1cm以上的有效芽仅1～2枚。当BA使用浓度增加到3mg·L-1至5mg·L-1时，接入的芽苗茎杆从中上部就开始肿大开裂，呈疏松的海绵状，愈伤团增大，但不定芽的数量减少，长度也都在0.5cm以下，有效芽都在1枚左右（见图版