02微生物控制菌檢查方法验证方案.doc

微生物控制菌检查方法验证方案微生物控制菌检查方法 片验证方案 编码：表 一、验证方案的起草与批准 1.验证方案起草 起草人： 起草时期： 年 月 日 2.验证小组成员： 3.验证方案审核 部门 审核人 日 期 生产部 生产车间 QC QA 4.验证方案批准 批准人： 批准日期： 二、验证方案 1.验证目的和原理 1.1验证目的 本实验是关于 片的微生物控制菌检查试验的验证。验证结果应显示对 片的微生物控制菌试验方法，对检品中可能存在的微生物没有抑制作用，符合验证要求。 1.2原理 按照已建立的药品微生物控制菌检查方法，通过已知菌数试液的对照菌的培训对照，验证其操作方法适合该药品的微生物控制菌的检测的正确性。 2.验证方法步骤 2.1验证前的准备：将所有的平皿和稀释剂都应该严格按照相关的灭菌程序消毒，以确保其对试验的结果没有影响。试验菌应选择相应的阴性对照菌。 2.2验证试验的操作计划：用3个不同批号产品按照微生物控制菌检测方法进行平行试验，通过观测是否长菌来判断。 2.3试验结果可接受标准：用标准菌株评价方法“ 片”的微生物控制菌检查试验对检品中微生物的抑菌性。试验结果应显示；阴性菌对照组不得检出阴性对照菌，试验组应检出试验菌。 3.试验实施 3.1试验前的准备 3.1.1主要仪器设备：恒温培养箱、生化培养箱、电子天平、高压蒸汽灭菌器、净化工作台。 3.1.2操作环境：操作间应该安装空气除菌过滤层装置。环境洁净度不应低于10000级，局部洁净度为100级（或放置同等级净化工作台）。操作间或净化工作台的洁净空气应该保持对环境形成正压，不低于5pa。 3.1.3试验样品： 片 批号： 批号： 批号： 3.1.4培养基： 培养基名称 培养基批号 配制日期 有效期至 营养肉汤培养基 BL增菌培养基 MUG培养基 3.1.5稀释液：PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 以上经115℃高压蒸汽灭菌30min。 3.1.6验证用微生物名称及其编号 实验菌株的来源： 菌株名称 内控编号 大肠埃希菌CMCC(B) 44102 Ec- 金黄色葡萄球菌 CMCC(B) 26003 Sa- 编号由菌名首字母—传代代数—制备日期组成。 3.1.7器具：无菌薄膜过滤器：（孔径0.45um直径50mm）、无菌培养皿（直径90mm）、无菌移液管（5ml）4.验证方法 4.1试验菌种的制备和稀释 接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至相应的营养肉汤或BL增菌液10ml中,30～35℃培养18～24小时。用无菌0.9%氯化钠溶液将上述培养物进行倍比递增稀释，制成每1ml含菌落数为50～100cfu的菌悬液。 4.2实验方法 A试验组 取1：10供试液10ml及含大肠埃希菌数为50～100cfu的菌悬液1ml加入到100mlBL增菌液中，30～35℃培养18～24小时。 B阴性对照组 采用金黄色葡萄球菌作为阴性对照用菌。方法同试验组。 5.试验结果 5.1验证用微生物的稀释度和接种量 菌种名称 稀释度 接种浓度（cfu/ml） 接种量（ml） 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 5.2试验组和阴性对照组结果 大肠埃希菌 批号 BL增菌液 MUG 靛基质 试 验 组 阴性对照组 注：＋为18～24小时有菌生长。 6.结论： 阴性对照菌试验：□检出阴性对照菌，大肠埃希菌18小时生长 。该检验方法 用于该样品的控制菌检验。 检验人： 复核人： 7.验证结果评价分析 质控部负责各项验证、试验结果记录，验证小组根据验证、试验结果进行评价，起草验证报告，报验证委员会。 验证委员会负责对验证结果进行综合评审，做出验证结论，发放验证证书。对验证结果的评审应包括： 验证试验是否有遗漏； 验证实施过程中对验证方案有无修改，修改原因、依据以及是否经过批准； 验证记录是否完整； 验证试验结果是否符合标准要求，偏差及对偏差的说明是否合理，是否需进一步补充试验。 8.最终审批 验证报告由验证