【2017年整理】与乳酸菌具有共生作用酵母菌培养基的优化.doc

与乳酸菌具有共生作用酵母菌培养基的优化 摘要：以对乳酸菌 （LC5） 有促进作用的酵母菌 （YE4） 为研究对象，OD 值和活菌数为测定指标，筛选合适的培养基。通过对 5 种酵母菌常用培养基的初筛及二次筛选，确定在 YPD 培养基中 YE4 生长良好。以 YPD 培养基作为基础培养基，进一步利用单因素试验和正交试验的设计方法对其进行优化，得出改良 YPD 培养基的最佳成分是大豆蛋白胨为 0.4%，胰蛋白胨为 0.4%，酵母浸提粉为 0.4%，蔗糖为 1.2%，蒸馏水为 100 mL。改良 YPD 培养基活菌计数测得的活菌数可达到 5.01×108CFU/mL，比 YPD 基础培养基高一个数量级；OD 值是 YPD 基础培养基的 1.06 倍。 关键词：酵母菌；培养基；优化 Optimization Medium of Yeast YE4 Having Symbiotic Function with Lactic Acid Bacteria LC5 Abstract：Yeast （YE4） is taken as research object，which can promote the role of lactic acid bacteria （LC5），and OD 600 and viable count are as determination of indicators to filter suitable medium of YE4. By selecting from 5 mediums which the YE4 usually used，the result shows that the YE4 grows very well in YPD medium. So YPD is selected as the base medium， by using single factor experiment and orthogonal test design method to optimize it，and the best ingredients of the modified YPD are that：soy peptone 0.4%，tryptone 0.4%，yeast extract powder 0.4%，sucrose 1.2% and distilled water 100 mL. The viable count of YE4 with modified YPD can reach 5.01×10 8 CFU/mL，which is more than basis medium one order of magnitude，also，the OD value is 1.06 times than the basis YPD medium. Key words：yeast （YE4）；medium；optimization 酵母菌是一种单细胞真核微生物 [1] ，是子囊菌、 担子菌等单细胞真菌的通称。多数酵母可以分离于 富含糖类的环境中，比如一些水果 （葡萄、苹果、 桃等） 或者植物分泌物 （如植物的叶子） [2] 。比细 菌的单细胞个体要大得多，一般为 1~5 μm 或 5~ 20 μm。酵母菌无鞭毛，不能游动。酵母菌的生殖 方式分为无性繁殖和有性繁殖两大类，其在有氧和 无氧的环境中都能生长，即酵母菌是兼性厌氧菌。 在有氧的情况下，它把糖分解成 CO 2 和水，且生长 较快；在缺氧的情况下，酵母菌把糖分解成酒精和 CO 2 。在现代工业中除了用于酿酒外，还用于甘油、 食用酵母、有机酸、酶制剂、石油脱蜡，以及饲料 等的生产 [3] 。酵母菌一般还能利用无机氮源或尿 素来合成蛋白质，已经成为目前最重要的单细胞蛋 白来源 [4] 。 在传统发酵乳制品中，乳酸菌与酵母菌作为益 生菌对产品的发酵过程发挥着主导作用。因此，乳 酸菌与酵母菌作为对人体有益的微生物，它们有着 相似的生长条件和营养需求，即共生基础。例如， 它们都能很好地利用糖来进行糖发酵。有研究表明 酵母泥中的大分子物质通过乙醇提取后，添加在合 成培养基上，可以缩短乳酸菌的迟滞期，增加乳酸 菌的数量，原因可能是酵母大分子物质能诱导乳酸 菌中氨基肽酶的合成，使氨基酸及小分子缩氨酸含 量增加，从而促进乳酸菌的生长；另外酒精发酵或 酵母自溶产生的吡喃甘露糖可以吸收中链脂肪酸， 解除其对乳酸菌的毒害作用，还可能增加乳酸菌的 α- 葡萄糖苷酶、β- 葡萄糖苷酶、N - 乙酰基 β- 表 1 L 9 （3 4 ）正交试验因素与水平设计 葡萄糖脱水酶及肽酶的活性，使培养基的营养丰富， 间接地促进乳酸菌的生长 [5] 。 Gobbetti M 等人 [6] 在 M