血液检验的一般检验技术(第一次).doc

第一章 血液检验的一般检验技术 实验一 血液标本采集 皮肤采血法 【目的】 掌握皮肤采血法（collection of skin puncture blood），了解不同部位采血对检验结果的影响、 【原理】 采血针刺破毛细血管后血液自然流出，用微量吸管吸收一定量的血液。 【器材】 1.一次性消毒采血针（图1-1）。 2. 20μl微量吸管（应校准后使用）或一次性微量吸管、胶乳吸头。 3.试管、试管架。 4．2ml吸管、吸耳球。 5. 75%（V/V）乙醇脱脂棉球或碘酊脱脂棉球。 6.无菌干脱脂棉或滤纸。 【试剂】 洗涤液3管（蒸馏水、95%乙醇、乙醚）。 生理盐水。 75%乙醇或碘酊。 【标本】末梢血 【操作】 1. 准备材料 仔细阅读患者申请单，决定采血量。准备每个试验所需的试管。例如取试管1支，加入2ml生理盐水。取微量吸管与胶乳吸头相连，检查连接处是否漏气，或取一次性微量吸管备用。 2. 选择采血部位 婴幼儿选择足跟采血，其他患者选择第三、四手指或耳垂（图1-2）。 3.按摩皮肤 轻轻按摩皮肤或用热毛巾温暖皮肤，使局部自然充血。 4.消毒皮肤 用75%乙醇脱脂棉球或碘酊脱脂棉球擦拭采血部位的皮肤，待干。 5.针刺皮肤 用左手拇指和示指固定采血部位使其皮肤和皮下组织绷紧，右手持一次性消毒采血针自指尖内侧迅速刺入（图1-3），深度2~3mm，立即出针。 6.拭去第1滴血 待血液自然流出或稍加压力流出后，用干脱脂棉擦去第1滴血。 7. 吸血 血液自然流出时，用微量吸管吸血至10μl刻度，然后用干脱脂棉压住伤口止血。如血流不畅，可以用左右自采血远端想指尖稍施压，使血液流出。 8. 止血 采血完成后，用干脱脂棉压住采血部位进行止血，若有可能，贴上创可贴。 9.稀释血液 用干脱脂棉擦净微量吸管外部后，将吸管伸入装有生理盐水的试管底部，慢慢排出吸管内的血液，并用上清液冲洗管内余血3次。 【注意事项】 1.采血前准备 在采集标本前，应使被检者尽量保持平静，减少运动。住院患者应尽量在早晨卧床时采血。尽量避免药物及饮食对检验结果的影响。在进行多项检查室，采集血液标本的顺序是血小板计数、红细胞计数、血红蛋白测定和白细胞计数与分类。 2. 选择采血部位 所选择采血部位的皮肤应完整，无烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症等。半岁一下婴幼儿由于手指小，可自拇指、足趾或足跟内、外侧缘采血；严重烧伤者可选皮肤完整处采血。 3. 消毒皮肤 因本实验具有创伤性，必须严格按无菌技术操作，防止采血部位感染，做到一人一针一管，避免交叉感染，最好用一次性采血针，皮肤消毒后，应待乙醇或碘酊挥发后采血，否则流出的血液不易成滴。 4. 针刺皮肤 进、出针要迅速，伤口要有足够深度。 5. 拭去第一滴血 因第一滴血混有组织液，应擦去。如血液不畅切勿用力挤压，以免造成组织液混入，影响结果的准确性。如采血用于自动血液分析仪，最好以优质无菌纸巾擦血，以免棉纤维混入，造成仪器堵孔。 6.吸血与检测 微量吸管应定期进行校准，容量误差≦1%。血液充入管内的速度不宜过快，避免出现气泡，血液弯月面达到刻度线处即可。标本采集后应及时测定，最好在2h内完成，不宜在冰箱内存放。 实验二 改良牛鲍计数板的使用 【目的】 掌握改良牛鲍计数板（improved Neubauer hemocytometer）的使用方法。 【原理】 一定倍数稀释的血液或体液，混匀后滴入具有固定体积和精密划分刻度的改良牛鲍计数板中，在显微镜下对所选择区域中的细胞进行计数，再乘以稀释倍数，即可换算成单位体积内的细胞数。 【器材】 1. 改良牛鲍计数板及盖玻片 改良牛鲍计数板为优质厚玻璃制成。每块计数板由“H”型凹槽分为2个同样的计数池（图1-8）。计数池两侧各有一条支持柱，较计数池平面高出0.10㎜。将特制的专用盖玻片覆盖其上，形成高0.10㎜的计数池。计数池内划有长、宽各3.0㎜的方格，平均分为9个大格，每个大格面积为1.0平方毫米，容积为0.1立方毫米（μl）。在这9个大格中，中央大方格用双线分为25个中方格，其中位于正中及四角的共5个中方格是红细胞、血小板计数区。每个中方格又用单线分为16个小方格。位于四角的4个大方格是白细胞计数区，它们分别用单线划分为16个中方格（图1-9）。 2. 试管、试管架。 3. 吸管、吸耳球。 4. 微量吸管、胶吸头、干脱脂棉。 5. 绸布。 6. 玻棒。 7. 显微镜。 【试剂】 1. 白细胞稀释液。 2. 红细胞稀释液。 【标本】 抗凝血 【操作】 1.准备计数板 先用流水冲洗计数板和盖玻片除去所有残留物，然后用乙醇洗涤，最后用绸布拭净，采用推压法从计数板下缘向前平推盖玻片，将其盖在计数池上。