ATN300型全自動定氮仪操作手册.doc

ATN-300型全自动定氮仪（蛋白质测定仪）操作说明手册 概述 蛋白质的测定方法，目前仍以1883年凯达尔氏(Kiedahl)发明的定氮法为基础，它根据各种蛋白质都具有固定比数的氮这一事实，通过对氮的测定而推算出蛋白质含量，此法所得的含氮量除了确定属于蛋白质组成成分的氮以外，还包括非蛋白质组成的其他有机及无机态氮，所以换算所得的蛋白质含量称作为粗蛋白含量，一般蛋白质中的含量为18%，换算后即每6.25克蛋白质中含有1克氮，因此6.25成为换算系数K，但是不同的农产品及其制品的实际含氮量有区别，所以不同农产品必须采用不同的换算系数，如花生、大豆、蚕豆、大麦、小麦、燕麦、黑麦等含氮为17.6%，求得K=5.7，荞麦、葵花籽、亚麻籽、大麻籽、棉花籽、蓖麻籽等换算系数则为K=5.50，玉米、菜籽为6.00，水稻为5.95，上述以外的其他农产品的换算系数均适用6.25。尽管如此，目前世界上还没有直接分离测定含蛋白质的可行方法。因此，迄今为止在国内外凯氏定氮法仍然是测定蛋白质含量的经典方法。所得结果准确、稳定。 我公司研制生产的ATN-300型全自动定氮仪（蛋白质测定仪），是引进消化吸收国内外检测新技术，结合我国国情，应用凯氏定氮法原理，采用化学与物理学相结合完成的成套蛋白质含量快速测定装置。为粮食、食品、饲料、农业、商检等检测部门提供了理想的检测设备。 工作原理 ATN-300型全自动定氮仪检测原理为： 整套装置，由电加热消化器、全自动蒸馏器两部分组成。要提高蛋白质含量测定的检测速度，其关键是要加速样品消化煮解的时间，ATN-300型全自动定氮仪消化装置采用井式电加热炉，增大了消化管受热面，使消化管连同管内所注入的10ml H2SO4及试样置入消化管插入井式炉内加热取得更佳的热效应，在消化前置入硒片作为催化剂进一步加速消化煮解，大大缩短消化时间。消化管内溢出的SO2等有害气体，通过消化管上的排污管经抽吸泵由水带入下水道，有效的抑制有害气体的外逸，由省略了实验室中安装毒气通风橱，试样经40分钟左右消化煮解，即可完全消化。 消化的过程主要反应如下： R·C·H·NH2·COOH + H2SO4 → CO2 + SO2 + NH3 + H2O 2NH3 + H2SO4 → (NH4)2SO4 蒸馏与吸收过程的主要反应如下： (NH4)2SO4 + 2NaOH → Na2SO4 + 2NH3 + 2H2O NH3 + 4H3BO3 → NH4HB3O7 + 5H2O 然后经滴定，计算蛋白质含量，滴定的过程是盐酸和硼酸氢铵反映的过程。 NH4HB3O7 + HCl + 5H2O → NH4Cl + 4 H3BO3 技术参数 测定品种：粮食、食品、饲料、酿造、土壤、制糖、乳制品、药物等物质 测定样品量：固体＜5g/个，液体＜15ml/个 测定范围：含氮量0.1~200mg (0.02%~95%) 测定数量：消化：一次同时消化个数按炉孔数定；单个蒸馏 测定时间：消化每批45min；蒸馏每个6min 测定重现性：平行试验结果符合GB/T 6423-94 电源：220V，50Hz 使用说明 其他仪器和用具 1．1分析天平：感量0.0001g 1．2实验室用粉碎机或研钵 1．3酸式滴定管：25ml或10ml 1．4锥形瓶：容积250ml 1．5分样筛：孔径0.45mm(40目) 2．试剂 2．1盐酸(HCl)：分析纯(GB622) 0.05mol/L标准液，(4.2ml盐酸，注入1000ml蒸馏水)碳酸钠法标定盐酸。 2．2氢氧化钠(NaOH)：化学纯或工业纯(GB629)、40g溶于蒸馏水中溶成100ml，配成40%水溶液(m/v)。 2．3硼酸(H3BO3)：分析纯(GB628)2g，溶于蒸馏水中配成100ml2%水溶液(m/v). 2．4混合指示剂：甲基红(G5H15N3O2)(HG3-958)溶于乙醇配成0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿(HG3-1220)溶于乙醇配成0.5%乙醇溶液，二种溶液等体积混合，阴凉处保存(保存期三个月以内)。 2．5硫酸铜(CuSO4·5H2O)分析纯(GB655)10g；硫酸钾(K2SO4) (HG3-920)分析纯150g，在研钵中研磨，仔细混匀后过40目筛(加速剂)。 2．6浓硫酸(H2SO4)化学纯(GB625)(含量98%、无氮)。 3．操作方法 3．1样品消化 称取经粉碎通过40-60目/寸试样0.5-1g(视含量而定)无损的置入已洗涤烘干的试管中加催化剂5g左右和10ml左右硫酸。 将消化管分别放入消化架各个孔内，然后置于消化炉上，开启抽气三通上连接的自来水龙头，使抽气三通处于吸气状态。接通电源，在加热初始阶段需注意观测，防止试样因急沸而飞溅。(初化时，选用电压型控温消