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* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 二、细胞移植 细胞移植 细胞移植分 ①同种细胞移植和异种细胞移植,同种细胞移植的供体多来源于脑死亡病人。同种移植受到供体来源不足限制。 ②异种细胞移植可解决供体短缺的问题,细胞来源主要为猪。 细胞移植分同种细胞移植和异种细胞移植 细胞移植 以猪为器官供体来源的优点为 猪已经与人类共同生活了数千年,没有严重的不可避免的共患疾病;猪的性成熟期短,繁殖快;有相当多的组织细胞与人类接近;此外,猪作为细胞供体来源,不存在伦理问题。 细胞移植 异种移植的免疫排斥反应以T淋巴细胞介导的细胞免疫为主,CD4+淋巴细胞是主要的效应细胞;免疫排斥B淋巴细胞、巨噬细胞和补体激活系统参与其中。目前可使用免疫抑制药物、生物半透膜、基因工程等方法抑制排斥反应。 细胞移植 (一)胰岛细胞移植 目前,我国在异种胰岛细胞(猪)经肝动脉或门静脉肝内移植治疗糖尿病方面,已经完成了动物实验研究,并已初步用于临床(此课题为国家自然科学基金,卫生部重点科研基金项目)。 细胞移植 胰岛细胞移植用于治疗Ⅰ型糖尿病病人、Ⅱ型糖尿病病人晚期、糖尿病肾病晚期。由于需要抗排斥反应治疗,合并恶性肿瘤和严重感染的糖尿病患者不能采用此治疗。 胰岛细胞抗原性弱,排斥反应以细胞免疫为主,但胰岛细胞脆弱易受损伤,发生排斥反应后往往形成不可逆的损伤。 细胞移植 国内等研究经肝动脉移植猪胰岛细胞肝内种植治疗Ⅰ型糖尿病安全、有效。移植后随着甲基强的松龙的逐渐减量和停用,病人胰岛素用量明显减少,对移植后病人随访发现2年疗效仍然存在,糖化血红蛋白水平正常。 细胞移植 (二)多巴胺能神经细胞移植 用于治疗帕金森病,在CT等影像设备的导引下将黑质细胞植入帕金森病病人纹状体区,提高已降低的多巴胺能神经递质,对帕金森病进行治疗。 细胞移植 (三)肝细胞移植 将分离、纯化后的同种或异种肝细胞移植到病人肝内、脾内或腹膜腔内,用于治疗肝功能衰竭,治疗由于肝细胞异常导致的代谢性疾病,改善终末期肝病病人的情况,为肝移植创造条件。 细胞移植 ①胚胎干细胞 也称为全能干细胞,可分化和复制成各系统细胞,如胰岛细胞。 ②体细胞干细胞 来源于血细胞干细胞、神经干细胞、间充质干细胞等。也称为多能干细胞,可分化为各种组织细胞。 ③单种组织干细胞 如胰岛组织干细胞,也称单能干细胞,具有增殖和分化能力,可分化为一定组织的的细胞。 (四)胚胎干细胞移植 干细胞分三类 细胞移植 干细胞具有正常核型,具有高的端粒酶活性和高的复制性,具有原始胚胎干细胞的表面标记,在体外可以不分化的增殖,种植于体内可以在局部微环境的诱导下分化为相应的组织。 肝干细胞分化成熟过程 图3、肝细胞分离技术,混有杂质 图4、胎肝细胞去除杂质 图5、胎肝细胞开始贴壁 图6、胎肝细胞充分贴壁伸展大量增殖 细胞移植 大鼠骨髓基质细胞(marrow stromal cell ,MSC)分离培养和经门静脉途径移植 图1、贴壁生长的MSC 图2、DAPI标记的MSC荧光显示 图3、移植后2hDAPI 标志的细胞集中于门静脉内 图4、移植1W后部分细胞离开血管进入肝实质 图5、移植3W后多数细胞分布肝实质内,布于肝细胞间 图6、移植4W后,DAPI标记细胞分布与肝实质内与肝细胞结合成索状排列 细胞移植 细胞移植 (五)转基因细胞移植 能够为细胞移植提供尽可能理想的细胞供体。 细胞移植 如异种胰岛细胞移植后发生的免疫排斥反应,是异种细胞移植的难题。利用腺相关病毒携带CTLA4-Ig基因进行体外转染猪胰岛细胞,阻断T淋巴细胞激活时的信号传递,可以有效的抑制T淋巴细胞的活化,使排斥反应减弱,而又不影响猪胰岛细胞的生理功能。这种经过转基因修饰的猪胰岛细胞移植后,宿主排斥反应相对减轻,移植猪胰岛细胞在病人体内的存活时间延长。 三、介入活检与分子探针特点 分子探针是常用的标记后连接药物和蛋白并产生信号的物质,用来检测特定的分子或生物过程、某一样品或基因组中特定的DNA序列或基因片段。 Weissleder指出进行分子影像学研究的3个关键问题:高度特异性的显像探针、合适的扩增方法以及高分辨率的成像系统。这3个条件中又以分子探针的研究最为重要,也是进行分子影像学研究的先决条件。 在分子影像学中,要求探针的分子量要小;与靶目标有高度的亲和力,而
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