NaCl脅迫对箭舌豌豆幼苗的生长及生理生化特性的影响.doc

NaCl胁迫对箭舌豌豆幼苗生长及生理、生化特性的影响 班级：生物科学112 姓名：孙良海 学号：1151202232 Nacl胁迫对箭舌豌豆幼苗生长及生理、生化特性的影响 摘要 研究了NACl2对箭舌豌豆幼苗生长及相关生理生化指标的影响。结果表明，相同生长条件下给予相同营养液，随着NACl2浓度的梯度逐渐升高相同部位植株的生长变化趋势地上地下部分长度均随NACl2浓度梯度逐渐升高而受到抑制，根鲜（干）重、茎鲜（干）重也随着NACl2浓度的增加而呈下降趋势。叶绿素含量随NACl2浓度上升而下降，，NACl2不同浓度梯度对箭舌豌豆幼苗的膜透性伤害一次增加。不同浓度的NACl2对箭舌豌豆幼苗Pro含量的影响不是很明显。 1.材料与方法 1.1试验材料及试剂 1.1.1材料：实验三中所培育的箭舌豌豆的幼苗 1.1.2试剂：NaCl（50mmol/L，100 mmol/L，150 mmol/L） 1.2试验方法 将砂基培养的箭舌豌豆幼苗分为1、2、3、4四组，每组八格，进行为期7d的盐处理，试验以含有0 mmol/L，50mmol/L，100 mmol/L，150 mmol/L NaCl的霍格兰全营养液分别处理。每组每隔48h浇灌一次5ml的全素营养液，同时浇灌5ml的盐溶液。第1组浇灌5ml的营养液，第2组浇灌50mmol/L的NaCl溶液，第3组浇灌100 mmol/L的NaCl溶液，第4组浇灌150 mmol/L的NaCl溶液。 组别 1 2 3 4 NaCl浓度 0 mmol/L 50mmol/L 100 mmol/L 150 mmol/L 1.3测定指标 1.3.1叶绿素含量的测定 试验材料与用品 进行胁迫处理后培育的箭舌豌豆植株，叶绿素仪。 试验方法 分别从4组箭舌豌豆植株上的同一部位取叶片20片，用叶绿素仪测定，每片叶片的叶绿素含量测3次，取平均值。然后对每组叶片的叶绿素含量取平均值。 实验数据及其处理： 次数 组别 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均值 第一组 10.5 8.7 7.0 6.1 10.8 4.1 22.1 5.6 6.5 21.4 10.2 第二组 12.4 15.2 13.7 9.7 17.8 20.3 9.7 16.1 12.8 21.2 14.8 第三组 4.1 6.9 7.0 6.1 10.8 4.1 22.1 5.6 21.4 6.5 9.46 第四组 16.3 12.1 13.7 9.7 17.8 20.3 9.7 16.1 12.8 11.2 13.7 实验结果分析与讨论： 试验结果表明, 盐胁迫7天后, 随着NaCl 浓度的增加, 箭舌豌豆幼苗中的叶绿素含量出现先增加后减少的趋势。当 NaCl 浓度为, 0.1mmol/l浓度时, 叶绿素的含量均明显高于对照及其他胁迫。随着浓度的增加, 箭舌豌豆幼苗中叶绿素的含量均逐渐减少, 到0.1mmol/l含量减至最低, 箭舌豌豆幼苗出现较大的盐害。 1.3.2 Pro含量的测定 试验材料与用品 进行胁迫处理后培育的箭舌豌豆植株，分光光度计，研钵，烧杯，容量瓶，试管，移液管，分析天平，水浴锅，离心机、滤纸，剪刀， 酸性茚三酮溶液：将1.25g茚三酮溶于30ml冰醋酸和20ml6mol/L磷酸中，搅拌加热（70℃）溶解，贮于冰箱中；2. 3％磺基水杨酸：3g磺基水杨酸加蒸馏水溶解后定容至100ml;冰醋酸,甲苯等。 试验方法 1. 标准曲线的绘制 （1）在分析天平上精确称取25mg脯氨酸，倒入小烧杯内，用少量蒸馏水溶解，然后倒入250ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，此标准液中每ml含脯氨酸100μg。 （2）系列脯氨酸浓度的配制取6个50ml容量瓶，分别盛入脯氨酸原液0.5，1.0，1.5，2.0，2.5及3.0ml，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，各瓶的脯氨酸浓度分别为1，2，3，4，5及6μg/ml。 （3）取6支试管，分别吸取2ml系列标准浓度的脯氨酸溶液及2ml冰醋酸和2ml酸性茚三酮溶液，每管在沸水浴中加热30min。 （4）冷却后各试管准确加入4ml甲苯，振荡30S，静置片刻，使色素全部转至甲苯溶液。 （5）将各管上层脯氨酸甲苯溶液倒至比色杯中，以甲苯溶液为空白对照，于520nm波长处进行比色。 （6）标准曲线的绘制：先求出吸光度值（Y）依脯氨酸浓度（X）而变的回归方程式，再按回归方程式绘制标准曲线，计算2ml测定液中脯氨酸的含量（μg/2ml）。 2. 样品的测定 （1）脯氨酸的提取：准确称取不同处理的待测植物叶片各0.2g，分别置大管中，然后向各管分别加入5ml3％的磺基水杨酸溶液，在沸水浴中提取10min，（提取过程中要经常摇动），冷却后过滤