贫血实验诊断t__培训课件.ppt

上海交通大学医学院 PNH不同时间尿样 Ham试验 上海交通大学医学院 （4）蔗糖溶血试验 （sucrose lysis test） 特异性敏感性均不如Ham试验，仅做筛选。 参考值：阴性 上海交通大学医学院 2. 酶缺陷的检验 （1）自身溶血试验及其纠正试验 G6PD缺陷 ：＋ATP：可纠正 但不能纠至正常 ＋G： 同上 PK缺陷： ＋ATP：可纠正 ＋G： 不纠正 上海交通大学医学院 （2） 变性珠蛋白小体生成试验 受检RBC＋乙酰苯肼 作活体染色（甲基紫） 37℃1~2h 有变性珠蛋白小体，则膜上形成紫黑色颗粒 结果：此类细胞5%即（＋） ，正常人30% 意义：不稳定Hb也可出现，故仅作筛选 见图 下一张 上海交通大学医学院 （3） 高铁血红蛋白还原试验 （methemoglobin reduction test） 正常值：定性法（－） 半定量法 还原率75% G6PD缺陷—定性（＋），半定量70%。 　 G6PD 高铁血红蛋白还原酶 G6P NADP 还原型美兰 HbFe3+ 6PG NADPH 氧化型美兰 HbFe2+ NaNO2 上海交通大学医学院 （4）氰化物-抗坏血酸试验 （ascorbate cyanide test） 结果：正常血液几小时后变暗色 意义：G6PD缺乏者血液变成棕色（巧克力色），纯合子在2h内即变色，杂合子要3~4h变化 上海交通大学医学院 （5）酶活性测定 G6PD PK 上海交通大学医学院 3. 珠蛋白合成异常的检验 血红蛋白的结构 原卟啉 血红素 Hb（四聚体） 铁 2条α链 珠蛋白：由4条多肽链组成 2条非α链 上海交通大学医学院 正常血红蛋白的种类 类型 肽链 所占比例 HbA α2β2 正常成人95% HbF α2γ2 正常成人2% 为胎儿期Hb主要成分 HbA2 α2δ2 正常成人2%-3% 上海交通大学医学院 （1）细胞形态学检查 Wright染色：小细胞低色素性，靶形红细胞易见 target cell 上海交通大学医学院 HbF酸洗脱法测定（acid elution test） HbF抗酸能力较HbA强，在酸性缓冲液中保湿一定时间，只有含HbF的红细胞不被洗脱，再用伊红染色呈鲜红色 成人阳性小于1%，地中海贫血患者阳性红细胞增多 上海交通大学医学院 HbH包涵体生成试验（HbH inclusions） 参考值0~5% 意义：HbH病者阳性红细胞可达50%以上 HbH包涵体 网织红细胞 Heinz小体 上海交通大学医学院 （2）血红蛋白电泳分析 ( hemoglobin electrophresis) 主要检查有无异常Hb区带 在HbA前出现——快速异常：HbH，J，K组 在HbA后出现——慢速异常：HbG，D，E组 上海交通大学医学院 （3）HbF定量测定（碱变性试验） (alkali denaturation test) HbF具抗碱作用 正常值：成人2%，新生儿55%~85%，1岁左右同成人 4%为升高，主要见于β地中海贫血 上海交通大学医学院 （4）异丙醇沉淀试验 ( isopropanol test ) 正常人Hb 40min后开始沉淀。 有不稳