第四节固相萃取解析.ppt

第四节固相萃取（solid phase extraction, SPE） 一、 固相萃取的原理与步骤 二、 固相萃取的装置 1. 固相萃取法的建立 2. 固相萃取的应用 一、 固相萃取的原理 固相萃取的基本原理与液相色谱分离过程相仿，是一种吸附剂萃取，主要适用于液体样品的处理。 当试样通过装有合适的固定相时，被测组分由于与固定相相互作用较强被吸附留在柱上，并因吸附作用力的不同而彼此分离，样品基质及其它成分与固定相作用较弱而随水流出萃取柱。被萃取的组分，用少量选择性溶剂洗脱。 自动固相萃取装置：萃取小柱、真空萃取箱和真空泵 二、 固相萃取的装置 SPE小柱 吸附剂的类型：C18、C8、氰基、苯基、双醇基填料、活性炭、硅胶、氧化铝、硅酸镁、高分子聚合物、离子交换树脂、排阻色谱吸附剂、亲和色谱吸附剂等。 柱型：容积为1～6 mL的柱体（通常是医用级聚丙烯管），在两片聚乙烯筛板之间填充0.1 ～ 2 g吸附剂。 三、 固相萃取法的建立 1 柱预处理（活化） 2 上样 3 除去干扰杂质（淋洗） 4 分析物的洗脱和收集（洗脱） ①活化 ②上样 ③淋洗 ④洗脱 ★ 三、 固相萃取法的建立 1 柱预处理 以C18固相萃取柱为例：先使数毫升的甲醇通过萃取柱，再用水或缓冲液顶替滞留在柱中的甲醇。 柱预处理的目的是①除去填料中可能存在的杂质；②使填料溶剂化。 三、 固相萃取法的建立 2 加样 试样溶液被加至并通过固相萃取柱。其间，分析物被保留在吸附剂上。 加到萃取柱上的试样量取决于萃取柱的尺寸（填料量）和类型、在试样溶剂中试样组分的保留性质和试样分析物及基质组分浓度等因素。 三、 固相萃取法的建立 注意： 为防止分析物流失，试样溶液强度应适当。 固相萃取柱选定后，应进行穿透实验，确定的试样体积。 穿透:在上样过程部分或全部目标化合物未被保留即流出小柱的现象。 三、 固相萃取法的建立 3 除去干扰杂质 用中等强度的溶剂，将干扰组分洗脱下来，同时保持分析物仍留在柱上。 对于反相萃取柱，清洗溶剂应为含适当浓度有机溶剂的水或缓冲溶液。 通过调节清洗溶剂的强度和体积，尽可能除去能被洗脱的杂质。 三、固相萃取法的建立 4 分析物的洗脱和收集 将分析物完全洗脱并收集在最小体积的级分中。 比分析物更强保留的杂质尽可能仍留在固相萃取柱上。 选择合适的洗脱溶剂强度和体积。 三、固相萃取法的建立 提高重现性的方法： ①使用内标法，加入适当的内标物作参比； ②加入样品的量适当，不超过穿透量； ③选择合适的清洗剂和洗脱剂，避免待测组分流失。 了解试样基质和待测组分的性质，如结构、极性、酸碱性、溶解度、大致的浓度范围等，对选择和确定与处理方法和条件都是有帮助的。 固相萃取法的步骤 ①活化 ②上样 ③淋洗 ④洗脱 ★ 全自动固相萃取 固相萃取的用途： ①从试样中除去对以后分析有干扰的物质 ②富集痕量组分，提高分析灵敏度 ③变换试样溶剂，使之与分析方法相匹配 ④原位衍生 ⑤试样脱盐 ⑥便于试样的存储和运送 四、固相萃取的应用 四、固相萃取的应用 动物源食品中的氯霉素残留量的测定 牛奶中青霉素类药物残留量的测定高效液相色谱法 土壤中9种磺酰脲类除草剂残留量的测定-液相色谱—质谱法 水果、蔬菜及茶叶中吡虫啉残留的测定-高效液相色谱法 鸡肉和鸡肝中己烯雌酚残留检测气相色谱-质谱法 动物源性食品中糖皮质激素类药物多残留检测液相色谱－串联质谱法 蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定 畜禽肉中保泰松残留量的测定-液相色谱-紫外检测法 食品中苏丹红染料的检测方法-高效液相色谱法 动物源性食品中四环素类兽药残留量检测 ……. 农兽药残留、食品添加剂的检测等 五、 固相微萃取（solid phase microextraction, SPME） 固相微萃取是在SPE基础上发展起来的新的萃取分离技术。 20世纪90年代初发展起来的。 适用于气体和液体样品的新颖的样品前处理技术．具有快速、灵敏、方便、样品需要量小、无需萃取溶剂、易于自动化的优点。 1． 固相微萃取装置构造与萃取过程 萃取头固定在不锈钢的活塞（注射芯）上 平时萃取头收缩在手柄内，当萃取样品时，露出萃取头浸在样品中，或置于样品上空进行定空萃取，有机物就会吸附在萃取头上，经2～30 min后吸附达平衡，萃取头收缩回鞘内，把固相微萃取装置撤离样品，完成萃取过程。 将固相微萃取装置直接引入气相色谱仪的进样口，推出萃取头，吸附在萃取头上的有机物就再进样口进行解吸，而后被载气送入毛细管柱进行分析测定。 1． 固相微萃取装置构造与萃取过程 1． 固相微萃取装置构造与萃取过程 2. 固相微萃取法的应用