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蔬菜中维生素c的测定剖析
蔬菜中维生素c的测定 制作人:薛钦 时间:2016年5月20日 蔬菜中维生素c的测定 1.实验背景 2.实验目的 3.实验原理 4.不同的测定方法 5.仪器试剂和样品 6.实验步骤 7.结果计算 8.注意事项 9.实验结果与讨论 一、实验背景 维生素C又叫抗坏血酸,是一种水溶性维生素。食物中的维生素C被人体小肠上段吸收。一旦吸收,就分布到体内所有的水溶性结构中,正常成人体内的维生素C代谢活性池中约有1500mg维生素C,最高储存峰值为3000mg维生素C。正常情况下,维生素C绝大部分在体内经代谢分解成草酸或与硫酸结合生成抗坏血酸-2-硫酸由尿排出;另一部分可直接由尿排出体外。 维生素C的作用: 1、促进骨胶原的生物合成。利于组织创伤口的更快愈合。 2、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢,延长肌体寿命。 3、改善铁、钙和叶酸的利用。 4、改善脂肪和类脂特别是胆固醇的代谢,预防心血管病。 5、促进牙齿和骨骼的生长,防止牙床出血,防止关节痛、腰腿痛。 6、增强肌体对外界环境的抗应激能力和免疫力。 7、水溶性强抗氧化剂,主要作用在体内水溶液中。 二、实验目的 1.人类营养中最重要的维生素之一。缺乏时引起坏血病。 2.维生素C含量可作为植物抗衰老和抗逆境的重要生理指标,也可作为果品质量、选育良种的鉴别指标。 3.水果、蔬菜保鲜贮藏必须测定维生素C含量,了解果蔬品质量的高低。 4.了解和掌握2,6-二氯酚靛酚测定维生素C含量的原理和方法。 三、实验原理 2,6—二氯靛酚是一种染料,其颜色反应表现为两种特性。一是取决于氧化还原状态,氧化态为深蓝色,还原态为无色;二是受其介质酸度的影响,在碱性介质中呈深蓝色,在酸性溶液介质中呈浅红色。? 用蓝色的碱性染料标准液,滴定含VC的酸性浸出液,染料被还原为无色,到达终点时,微过量的2、6—二氯靛酚染料在酸性溶液中呈浅红色即为终点。从染料消耗量即可计算出试样中还原型抗坏血酸量。 2.6-二氯酚靛酚滴定法 维生素C: 强的还原性 将染料2.6-D 还原成无色的2.6-二氯酚靛酚 2.6-二氯酚靛酚:强的氧化性 中性/碱性: 蓝色 酸性:红色 =N — — O- Cl | O= | Cl 氧化型2.6-二氯酚靛酚(蓝色) =N — — OH Cl | O= | Cl 氧化型2.6-二氯酚靛酚(红色) O =C | HO— C ‖ HO— C | H— C | HO— CH | CH2OH O 还原型 抗坏血酸 O =C | O = C | O = C | H— C | HO— CH | CH2OH O 脱氢 抗坏血酸 N — — OH Cl | HO | Cl — — | H 还原型2.6-二氯酚靛酚 (无色) 四、不同的测定方法、 目前研究维生素C测定方法的报道较多,有关维生素C的测定方法。 荧光法。 2,6-二氯靛酚滴定法。 2,4-二硝基苯肼法。 分光光度分析法。 碘量法。 荧光法 原理?:? 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后,与邻苯二胺反应生成具有荧光的喹喔啉,其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比,以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。?? 脱氢抗坏血酸与硼酸可形成复合物而不与邻苯二胺反应,以此排除样品中荧光杂质所产生的干扰。本方法的最小检出限为0.022?g/ml。 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。 2,4-二硝基苯肼法 原理??: 总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸。样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸,再与2,4-二硝基苯肼作用生成红色脎,脎的含量与总抗坏血酸含量成正比,进行比色测定。 本方法适用于蔬菜、水果及其制品中总抗坏血酸的测定。 碘量法 原理 : 维生素C包括氧化型、还原型和二酮古乐糖酸三种。当用碘滴定维生素C时,所滴定的碘被维生素C还原为碘离子。随着滴定过程中维生素C全被氧化,所滴入的碘将以碘分子形式出现。碘分子可以使含指示剂(淀粉)的溶液产生蓝色,即为滴定终点。 由于维生素C分子中的烯二醇基有极强的还原性,能被碘氧化,用碘滴定VC。 分光光度分析法 原理: 维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被氧化成脱氢抗坏血酸。 通过吸收光谱曲线法确定维生素C的水溶液的最大吸收波长为2
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