红细胞渗透脆性实验和血凝.doc

成都农业科技职业学院 《动物解剖及生理学》 实验指导 （畜牧兽医专业适用） 二零零七年八月 基本技能训练一 显微镜的使用及基本组织观察 学时安排：2学时 目的要求 通过本次实验，使学生掌握显微镜的基本结构及使用方法。认识上皮组织的种类及构造，并能够辩认各种上皮认识结缔组织的基本形状和构造；并熟记各种结缔组织间的区别掌握肌肉组织的特点，并能区分三种不同的肌肉 光电显微镜、切片。 三、技能内容与方法步骤 1．显微镜的一般构造：分光学部分和机械部分：光学部分目镜：装在镜筒上端，里面装有指针，常用的为10×目镜。物镜：装在转换器上，一般常用的物镜为4×、10×、40×和100×（油浸镜头）。集光器：包括聚光镜和光圈（虹彩）两部分。装于载物台下面。机械部分镜座：为显微镜基部，用以固定镜身。载物台：为放置标本的平台，其中有通光孔，两旁有压片和标本移动器。镜头转换器：位于镜筒之下，可装物镜，为转换不同倍数的物镜用。粗调节轮：旋转时，载物台升降距离较大。微调节轮：旋转一周，可使镜头升或降0.1毫米。镜臂：供握持显微镜用。粗调限位器：拨下限位器使载物台只能使粗调上升至所限位置，可避免因操作不慎而导致高倍镜与标本相碰。2．显微镜的使用方法低倍镜使用法：①将×物镜移至中央（位于光轴上），旋动粗调节轮使物镜与载片相距1厘米左右。②打开光圈，上升集光器至镜平台，用左眼或右眼在目镜中观察（两眼都要睁开），同时用反光镜（自带光源的显微镜除外）③将切片标本置于载物台上，使切片内的标本，对准镜台中央小孔，然后用压片夹固定切片。以左眼或右眼对准目镜，进行观察。旋动粗调节轮，使载物台渐渐上升，至标本的影象现出为止，拨动粗调限位器限位。旋动细调节轮，使载物台上、下微微移动，直到显出清晰的影象。高倍镜使用方法：依前法先用低倍镜将焦点调准，使物象清晰。将欲检标本的某一部分移至低倍镜视野中央。③下降载物台，转动转换器，将高倍物镜移至中央（位于光轴上）旋动粗调节轮，使载物台渐渐上升，至标本的影象现出为止④旋动细调节轮，使载物台上、下微微移动，直到显出清晰的影象。油镜的使用方法：用油镜前，先将集光器上升到顶，虹彩放大，使亮度达到最强度。将需要详细观察的部分，移到视野中心，用压片夹固定，切勿移动。将高倍物镜移开，滴加一滴香柏油于切片被检部位转换油镜头，旋动粗调节轮，使载物台渐渐上升，使镜头与被检物间充满香柏油，然后转动细调节轮，直至有清晰的物象为止，此时切勿使用粗调节轮，以免压碎切片，损坏镜头。用完油镜后，必须将镜头和切片上的香柏油用擦镜纸擦去，并用沾有乙醚——酒精液（7：3）的擦镜纸擦拭镜头及载片，以免污损镜头。3．使用显微镜注意事项移动显微镜时一手紧握镜臂，一手平托镜座，使镜身保持直立状态。凡光学部分不可用手指或其它物品（如毛巾、纸张）擦拭，要用清洁的擦镜纸，必要时加一滴乙醚——酒精液擦拭。不得随意拆卸显微镜的任何组成部分。不能用高倍镜检视任何不加盖片的标本，以免污染物镜，显微镜任何部分不应受潮。掉换高倍物镜或油浸镜，转换镜头，旋动粗调节轮，使载物台渐渐上升，以免损坏载片及镜头。⑥在切片和镜头很接近的情况下，要在看目镜的同时用余光注意两者之间的距离，以免损坏载片及镜头。⑦左手写字右眼看目镜，右手写字左眼看目镜，两眼同时睁开。⑧使用中发生问题时，请随时报告教师，切勿自行处理。．㈠上皮组织 1、单层单层扁平上皮肠系膜装片，硝酸银镀染。肠系膜厚薄不同，在观察时应选择标本最薄的部分，细胞间界限由于硝酸银镀染而呈黑色、被镀染的黑色锯齿状线不是细胞膜。而是细胞之间的细胞间质。此种黑线，可以将肠系膜的间皮细胞和微血管的内皮细胞界限区分清楚，细胞质部分稍呈淡黄色，核呈空泡样（如用染料复染，则可显示出）。单层柱状上皮猪十二指肠横切片，或胆囊切片。Bouin氏液固定，石蜡包埋，苏木素——伊红染色（HE染色）低倍镜下十二指肠横切片，可见到小肠的腔面有许多高矮不一的指状突起，这些突起是小肠绒毛的纵断面。其表面覆盖着一层柱状上皮，选择一部分排列整齐，换高倍镜观察。在高倍镜下，柱状细胞排列紧密，细胞的高度大于宽度，细胞界限不太清晰。胞核呈椭圆形，位于细胞的基部。细胞的游离面（朝向肠腔的一面）上，在光学显微镜下可见到一薄层红染的结构称纹状缘（电镜下为胞质的微小突起称微绒毛），细胞的基底面与基膜相接（基膜用特殊染色才可显示出来），基膜的下方为结缔组织。在柱状上皮细胞之间，有散在的杯状细胞。杯状细胞外形呈高脚酒杯状，顶部充满粘原颗粒，基部有细胞核。另外在柱状细胞间，有时可见到深染的淋巴细胞。假复层柱状纤毛上皮猪气